磁流体热疗对胰腺癌治疗作用的研究

来源 :昆明医学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:ruru0077
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目的:观察磁流体(magnetic fluid,MF)在交变磁场(alternating magnetic field,AMF)中的升温行为并探讨其作为热疗介质应用于小鼠胰腺癌动物模型的热疗。方法:通过细胞形态学观察、染色体核型分析、免疫荧光(chymotrypsin和pan-cytokeratin)和细胞成瘤性的观察鉴定我们前期建株的小鼠胰腺癌细胞系(mouse pancreatic cancer cell,MPC-83)。体外实验将不同浓度Fe3O4水基磁流体置于中频交变磁场中观察其升温情况,透射电子显微镜(transmission electronmicroscopy,TEM)观察磁性纳米颗粒被MPC-83吞噬的情况。体内实验选择4周龄雌性昆明种小鼠,利用MPC-83建立小鼠胰腺癌皮下肿瘤模型。实验分4组:空白组;磁流体组;交变磁场组;热疗组;同时热疗组又分为2个亚组(肿瘤中心温度分别为47℃和51℃)。肿瘤种植后10 d左右将0.2 ml浓度为1.2g/ml磁流体直接注射到肿瘤内,通过X线评估磁流体注射后24 h和热疗后14 d磁性纳米颗粒在肿瘤中的分布,磁流体注射24 h后将荷瘤小鼠置于中频交变磁场中,通过调节磁场电流强度将肿瘤中心温度维持在47℃和51℃,作用30 min。观察磁流体热疗对肿瘤生长和小鼠生存期的影响及其病理学变化。结果:倒置显微镜观察MPC-83呈梭形和不规则形,贴壁生长;透射电镜观察细胞表面微绒毛丰富凸向腔内,核大畸形,异染色质不规则边集于核膜,核仁大,核糖体丰富。染色体核型分析MPC-83均为小鼠染色体核型,染色体众数60条~69条,异常近中着丝点染色体约占20%。免疫荧光示chymotrypsin和pan-cytokeratin均呈阳性表达。成瘤性观察MPC-83小鼠成瘤率为100%。在交变磁场中磁流体迅速升温,且升温与磁流体的浓度呈显著正相关关系(n=5,r=0.937,P=0.019)。透射电子显微镜下(×120000)观察磁性纳米颗粒可被MPC-83吞噬。在荷瘤小鼠热疗中通过调节磁场电流强度,肿瘤中心温度维持在47℃和51℃,升温曲线平坦,而直肠温度在36℃以下。热疗后14 d实验组小鼠肿瘤体积较各对照组明显缩小(P<0.05),生存期明显延长(P<0.05)。X线检查提示注射磁流体24 h磁性纳米颗粒可以均匀的分布于肿瘤组织,热疗后14 d可见小鼠皮下残存的磁性纳米颗粒。组织病理学检查见热疗即刻肿瘤细胞呈凋亡、坏死改变,热疗后14 d小鼠皮下无肿瘤细胞,可见残存的磁性纳米颗粒被吞噬细胞吞噬。免疫组织化学提示,热疗后即刻热休克蛋白70(heat shockprotein 70,HSP70)于肿瘤细胞浆呈强阳性表达,较对照组表达增强;肿瘤细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)不表达或表达较弱,而对照组肿瘤细胞核呈强阳性表达。结论:MPC-83为一株来源于小鼠胰腺腺泡上皮的肿瘤细胞。肿瘤治疗用磁流体可以在交变磁场中产热,通过改变磁流体浓度可进行温度控制,小鼠胰腺癌细胞对磁性纳米颗粒有较强的吞噬能力。磁流体热疗能安全有效抑制小鼠MPC-83胰腺癌的生长,延长生存期,具有较好的治疗效果。
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