【摘 要】
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目的:探讨表达IDO的KC在体内外对同种异体T淋巴细胞增殖的抑制和凋亡作用。 方法:联合链酶蛋白酶和胶原酶在体灌注和离体消化的方法分离小鼠KC,实时荧光定量PCR检测经IFN-γ处理或未处理的KC表达IDOmRNA和FasLmRNA的情况。高压液相色谱仪分析IDO对色氨酸的分解作用以了解其活性。3H嵌入增殖试验检测KC对同种异体T淋巴细胞增殖的抑制情况。流式细胞仪分析KC对同种异体T淋巴细胞
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目的:探讨表达IDO的KC在体内外对同种异体T淋巴细胞增殖的抑制和凋亡作用。 方法:联合链酶蛋白酶和胶原酶在体灌注和离体消化的方法分离小鼠KC,实时荧光定量PCR检测经IFN-γ处理或未处理的KC表达IDOmRNA和FasLmRNA的情况。高压液相色谱仪分析IDO对色氨酸的分解作用以了解其活性。3H嵌入增殖试验检测KC对同种异体T淋巴细胞增殖的抑制情况。流式细胞仪分析KC对同种异体T淋巴细胞的细胞周期和凋亡作用。构建BABL/c→C57BL/6的皮肤移植模型,分为KC(未处理)、KC(IFN-γ,处理)、KC(1—MT)及生理盐水组,除了生理盐水组外,于移植术前14、7、2天给受体输入供体KC,同时1—MT组于移植术后0~7天经腹腔注射1—MT(0.9mg/kg/d),观察各组别对皮肤移植物存活时间的影响。于移植术后第7天每组各取1只行小鼠皮瓣HE染色和TUNEL以检测淋巴细胞浸润和凋亡情况。Kaplan-Meier对数秩检验对各组进行生存分析。 结果:实时荧光定量PCR提示KC并不组成性表达IDO,但是经IFN-γ处理后,IDO和FasL在6h后表达量相对较高。IDO能降低培养基中色氨酸的浓度,升高其代谢产物犬尿氨酸浓度。表达IDO的KC能明显抑制同种异体T淋巴细胞的增殖,但1-MT和抗FasL抗体能部分阻断其增殖抑制作用,并且存在剂量依赖关系。表达IDO和FasL的KC能阻止同种异体T淋巴细胞于G1中期,诱导其凋亡。输入表达IDO和FasL的
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