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试验首先建立辣椒的遗传转化体系,再用农杆菌介导法将从辣椒中分离获得的CaWRKY2, CaWRKY3, CaWRKY4, CaWRKY5, CaDREB, CaNAC, CaI1基因所构建的干扰载体对辣椒普通栽培种P009,P020,P120,P121辣椒品种进行了遗传转化,获得了抗性再生植株,并对所获得的转基因苗进行了初步的RT-PCR分子鉴定及抗病性分析,目的是为进一步进行CaWRKY家族基因以及其他基因功能分析以及抗病机制研究提供研究材料,并为辣椒建立了一个高效稳定的遗传转化体系,为进一步开展辣椒基因工程遗传改良和辣椒功能基因组学研究奠定了基础。试验主要结果如下:(1)选取辣椒品种P009, P020, P120, P121进行辣椒离体再生体系优化。试验得出最适小苗苗龄为8-15d,最佳外植体为去顶芽茎尖生长点,最佳培养基为MS+5.0mg/L 6-BA +0.5 mg/L IAA+4.0 mg/L AgNO3 +蔗糖30g,pH5.8。(2)P009, P020, P120, P121去顶芽茎尖生长点,带柄子叶经过预培养,与农杆菌的共培养,筛选培养,伸长培养,生根培养获得离体再生转基因苗。预培养与共培养培养基为MS+5.0mg/L 6-BA +0.5 mg/L IAA+4.0 mg/L AgNO3+100 mg/L AS+蔗糖30g, pH5.8;诱导筛选培养基MS+5.0mg/L 6-BA +0.5 mg/L IAA+4.0 mg/L AgNO3+70 mg/L Kan+500 mg/L Cb+蔗糖30g, pH5.8;伸长培养基MS+2.0mg/L 6-BA +0.2 mg/L IAA+1.0 mg/L GA3+4.0 mg/L AgNO3+70 mg/L Kan+500 mg/L Cb+蔗糖30g, pH5.8;生根培养基1/2 MS+200 mg/LCef+蔗糖30g, pH5.8。(3)EHA105根癌农杆菌介导的辣椒遗传转化的最佳条件是:外植体在诱导培养基上预培养1-3d,农杆菌共培养前在含50mg/L Rif, Spec和100mg/L AS两次活化,侵染OD600值为0.3-0.6,侵染10 min,25℃、黑暗条件下共培养2-3 d。(4)获得了17株P009转iCaDREB转化植株; 5株P020转iCaWRKY4转化植株; 21株P120转iCaWRKY2转化植株; 2株P120转iCaWRKY3转化植株; 15株P120转iCaWRKY4转化植株; 12株P120转iCaWRKY5转化植株;9株P120转iCaI1转化植株; 9株P120转iCaNAC转化植株株;6株P121转iCaNAC转化植株;以上植株经PCR分子检测均显阳性。(5)初步选用转化植株较多的P120转化iCaWRKY4,iCaWRKY5转化植株做抗辣椒疫霉病害分析。基因沉默的转基因植株其抗辣椒疫霉病害能力明显增强,用基因特异性CaWRKY4, CaWRKY5引物对疫霉处理的转基因苗进行RT-PCR检测,研究结果表明,相比于对照,CaWRKY4, CaWRKY5基因已完全沉默。