目的:探讨是否可以成功构建HGF、IL-10基因及二者融合基因的质粒载体,并分别转染入HepG₂细胞,从而进一步验证融合基因对转染后HepG₂细胞增殖有何作用。方法:（1）进行RT-PCR扩增HGF、IL-10cDNA,构建融合基因质粒载体,制备重组体;（2）将重组体分别转染HepG₂细胞并用RT-PCR和WestBolt检测各组基因在转染后HepG₂细胞中的表达;（3）设空白质粒对照组、HGF转染组、IL-10转染组和IL-10-HGF转染组,通过MTT法检测各组基因对转染后HepG₂细胞增殖的抑制作用。结果:（1）成功的构建IL-10、HGF重组表达载体pCDNA3.1-IL-10、pCDNA3.1-HGF以及两者融合基因重组表达载体pCDNA3.1-IL-10-HGF;（2）成功的将pCDNA3.1-IL-10、pCDNA3.1-HGF及pCDNA3.1-IL-10-HGF转染入HepG₂细胞,RT-PCR结果显示,各组细胞中均检测到IL-10、HGF基因的转录,而基因转染组细胞相应的目的基因转录水平有显著提升,表明转染组中各目的基因表达增强;（3）通过WestBolt检测证实经转染后HepG₂细胞内pCDNA3.1-IL-10、pCDNA3.1-HGF及pCDNA3.1-IL-10-HGF均有不同程度的表达;（4）MTT法示,24小时各组对转染后HepG₂细胞增殖抑制作用无明显区别（P>0.05,无统计学意义）;48小时及96小时IL-10-HGF转染组对转染后HepG₂细胞增殖抑制作用较其他各组有差异（P<0.05,有统计学意义）;IL-10-HGF转染组在24小时、48小时及96小时对于转染后HepG₂细胞增殖抑制作用都有明显差异,呈一定时间依赖性（P<0.05,有统计学意义）。结论:（1）通过RT-PCR技术,对表达载体和目的基因的酶切以及重组质粒的扩增与提取,可以获得序列完全正确的pCDNA3.1-IL-10、pCDNA3.1-HGF及pCDNA3.1-IL-10-HGF重组基因质粒载体;（2）pCDNA3.1-IL-10-HGF重组基因质粒载体稳定转染HepG₂细胞后,对其细胞增殖抑制作用较分别各自转染pCDNA3.1-IL-10及pCDNA3.1-HGF组明显,且呈一定时间依赖性。