光合细菌的分离鉴定及胶状红长命菌分泌的蛋白水解酶生化性质的研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:msbt098
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
不产氧光合细菌(以下简称光合细菌)是地球上最古老的细菌类群之一。它们能以光作为能源在厌氧光照条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体及碳源进行光合作用。光合细菌广泛分布于自然界的土壤、水田、沼泽、湖泊、江海等处,主要分布于水生环境中光线能透射到的缺氧区。由于光合细菌具有独特的生活方式,因此它在农业、环保、医药等方面均有较高的研究和应用价值。   从不同来源的样品中富集分离到28株光合细菌。通过对形态、颜色,碳源、氮源利用以及16S rDNA序列的分析,将其分为5类,并选择了8株菌进行了测序,并构建了系统发育树。共分离到四种光合细菌分别为胶状红长命菌(Rubrivivax gelatinosus)、荚膜红细菌(Rhodobacter capsulate))、类球红细菌(Rhodobacter sphaerorides)和沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palutris)。   胶状红长命菌(Rubrivivax gelatinosus)是目前发现的光合细菌中唯一能够分泌蛋白酶的菌株。本研究从分离得到的光合细菌中选取胶状红长命菌H1(Rubrivivax gelatinosus H1)作为研究对象,研究了培养条件对其胞外蛋白酶分泌的影响,并对其分泌的胞外蛋白酶的生化特性进行了初步的研究。研究发现菌株H1在黑暗好氧的培养条件下,培养液的上清液中均未能检测到胞外蛋白酶活性,说明在黑暗好氧培养下该菌株不产生胞外蛋白酶。而在厌氧光照培养条件下,在对数生长期阶段胞外蛋白酶活力随细菌快速繁殖而迅速升高。在132h时,细菌生长达到顶峰,同时蛋白酶活力也达到最大值。当进入衰亡期后,蛋白酶活力也随之下降。   不同培养基成分对菌株H1产胞外酶的研究结果显示,菌株H1分别以苹果酸为碳源时,以谷氨酰胺或氯化铵为氮源时,分泌的蛋白酶酶活最高。研究还发现,丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF能抑制该蛋白水解酶的活性,但其它型丝氨酸蛋白酶抑制剂、金属离子型蛋白酶抑制剂以及半胱氨酸/丝氨酸型蛋白酶抑制剂均不能抑制蛋白水解酶的活性,这表明该蛋白酶有可能是一类丝氨酸蛋白酶。   蛋白酶的生化特性研究还显示,蛋白酶的最适反应温度为40℃,最适反应pH为8.0;且该酶对多种有机试剂或变性剂具有较强的耐受性;多种二价金属离子对该酶的活性基本没有促进或抑制作用。
其他文献
本文以玉米(Zea maysL.)为实验材料,研究VB1促进盐胁迫下玉米种子萌发和对盐胁迫下幼苗生长的影响机制。首先进行耐盐性和不耐性玉米种子的筛选,确定试验所使用的NaCl浓度,然后进
摘要:随着社会的飞速发展,教育进入了素质教育的关键时期,提高教育质量,培养学生能力,同时又避免运用低效的填鸭式教学模式,增强学生的学习兴趣,积极去探究问题,是当前教育研究的重要课题。笔者结合自己的教学实践,论述了新课改下初中语文素质教学,以期对增强课堂教学的有效性有所帮助。  关键词:新课改;学习兴趣; 素质教育;有效性;语文课堂  语文和人们的生活息息相关,它将伴随人的一生,语文学习就是一个提高
目的通过建立大鼠慢性溴氰菊酯(DM)染毒模型,探索DM所致肝脏DNA损伤的修复机制。方法本课题采用慢性毒性实验,将大鼠随机分为4组(每组8只),分别为低剂量组(溴氰菊酯1.56mg/kg)中剂量组(溴氰菊酯3.12mg/kg).高剂量组(溴氰菊酯6.25 mg/kg)及对照组,连续灌胃染毒5d停2d,染毒时间为24w。观察在实验期间,各组大鼠的行为变化;实验结束大鼠在禁食、但自由饮水24h后处死,
土地利用由自然林地向耕地、住宅用地等非自然土地类型的转变是淡水生态系统生物多样性的主要威胁之一,而这种威胁主要在不同的时间和空间尺度上通过影响营养盐、水温、有机