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背景和目的肺癌的发病率和死亡率均占据全球恶性肿瘤的首位。根据病理类型的不同肺癌可以分为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)和小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC)两类,其中非小细胞肺癌占肺癌总发病率的85%。大部分肺癌患者确诊时为局部晚期及远处转移,失去手术机会,放疗和化疗是这部分NSCLC患者的主要治疗方法。由于肿瘤细胞遗传特性的改变、肿瘤组织内乏氧状况以及肿瘤细胞处于细胞周期的不同时相,在控制毒副反应的同时难以达到肿瘤的放射致死剂量。在许多肿瘤包括NSCLC中,表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)信号或活性异常是肿瘤发生发展过程中的重要因素,已成为临床常见治疗靶点。EGFR高表达常常预示着预后较差和放射治疗抵抗。同时HER2在放射抵抗中也扮演重要的角色。阿法替尼(Afatinib, BIBW2992)是新一代酪氨酸激酶抑制剂,能够不可逆的结合EGFR和HER2。本研究拟观察阿法替尼对A549细胞是否具有放射增敏作用,并探讨其可能的机制。方 法体外培养人肺腺癌A549细胞,MTT比色法检测不同浓度的阿法替尼对人肺腺癌A549的抑制作用,计算IC50,选择24h时IC50的1/10～1/5作为后续实验浓度。克隆形成实验检测阿法替尼联合或不联合放射线对A549细胞的作用,计算存活分数并绘制细胞存活曲线。流式细胞术检测各处理组细胞凋亡和细胞周期的变化情况。Western blots检测Bcl-2和Bax的表达。结 果1.MTT结果显示阿法替尼对人肺腺癌A549细胞具有增殖抑制作用,并且呈剂量和时间依赖性。阿法替尼24小时IC50为(2.23±0.14)μmol/L。2.体外克隆形成实验结果显示,放疗+阿法替尼联合组的Dq、D0和SF2均明显低于单纯放疗组；放疗+阿法替尼联合组SER为1.37。阿法替尼对A549细胞具有明显的放射增敏效应。3.流式细胞术检测细胞周期结果显示阿法替尼可以使A549细胞阻滞于G0/G1期；与放射线联合后,使S期比例降低。细胞凋亡的检测结果显示阿法替尼提高了放射线诱导的细胞凋亡。Western bolt检测结果显示放射线可以使Bax蛋白表达增加和Bcl-2蛋白表达减少,阿法替尼联放射线后这种趋势最明显。结论阿法替尼对人肺腺癌A549细胞具有放射增敏作用。其机制涉及到使细胞周期中对放射线抗拒的S期细胞比例降低,增加放射线诱导的细胞凋亡。推测阿法替尼通过使增加Bax蛋白表达和减少Bcl-2蛋白表达来增加放射线诱导的细胞凋亡。