丙型病毒性肝炎是严重危害人类健康的传染病。全球丙肝病毒(HCV)的感染人数约为一亿七千万，占世界人口总数的1-3％。在感染的人群中，约80％转为慢性，20％发展为肝硬化和肝细胞癌；我国的HCV感染者占人口总数的3.2％，估计感染者总数约为4000万。 自从1989年HCVcDNA首次被克隆成功至今，对HCV的分子生物学研究取得了突飞猛进的发展。目前已明确，HCV为单股正链RNA病毒，属黄病毒科，全长约9600个核苷酸，ORF区编码3010个氨基酸的多聚蛋白前体，经过宿主和病毒本身基因编码的蛋白酶裂解为十个功能性片段，其中四个为结构蛋白，分别是核心蛋白C、包膜蛋白E1、E2以及P7；六个为非结构蛋白，分别是NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B。尽管HCV的基本结构已经清楚，但是HCV的防治仍然是世界性的难题，α干扰素和病毒唑联合治疗是唯一的治疗方法，但这种治疗方法只对不到50％的患者显效，且具有费用高、易复发和副作用多等缺陷；尤其是我国流行的HCV-Ⅱ/1b型，对α干扰素的治疗应答最低，因此发展治疗和预防性丙肝疫苗，对于预防HCV感染和控制感染者的病情发展，都具有重要的意义。 HCVNS3蛋白具有丝氨酸蛋白酶和解旋酶活性，参与病毒蛋白翻译后加工，为病毒复制所必须，针对NS3蛋白的T细胞应答与自限性感染关系密切。目前公认位于NS3区的1248-1261位氨基酸残基为CD4+Th1细胞表位，而且该表位对于MHC限制性具有广谱特异性。本研究以BALB/c小鼠为实验动物模型，以MHCⅡ抗原提呈通路中的分子伴侣Ii链为载体，用HCV-NS3的1248-1261表位替换Ii链的CLIP编码片段构建了内源性靶向基因疫苗，同时克隆了BALB/c小鼠的抗原提呈分子I-Adαβ链分子的编码基因，在细胞水平研究了所构建的基因疫苗与抗原提呈分子之间的相互作用，并用构建的基因疫苗免疫BALB/c小鼠，研究了免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫应答，在细胞水平和体内免疫研究的基础上，为了对疫苗的有效性作出初步的评价，用稳定转染HCV-NS3的BALB/c小鼠SP2/0细胞构建了荷瘤小鼠模型，用所构建的疫苗对荷瘤小鼠进行了免疫治疗，结果表明：1内源性靶向基因疫苗在真核细胞合成后，HCV-NS3Th1表位能够与MHC-Ⅱ抗原提呈分子结合，形成抗原表位/MHCⅡ分子复合体。 2形成的抗原表位/MHCⅡ分子复合体能够到达细胞表面。 3BALB/c小鼠免疫的结果显示，内源性靶向基因疫苗主要刺激小鼠产生Th1类型的细胞免疫；而非靶向对照疫苗主要刺激小鼠产生的是Th2类型的细胞免疫。 4对HCV-NS3荷瘤小鼠的免疫治疗显示，内源性靶向基因疫苗在抑制肿瘤生成、限制肿瘤生长、延长成瘤小鼠的生存时间等方面优于非靶向对照疫苗。综上所述，本研究在国内外首次以Ii链作为载体构建了针对HCV-NS3的Th1表位内源性靶向基因疫苗，细胞水平和体内水平以及初步疗效的研究结果都表明，以Ii链作为载体诱导机体产生Th1类型细胞免疫是可行的，这种方法有望为HCV的防治提供一种可行的途径，在治疗性HCV基因疫苗的开发研究中具有良好的应用前景。