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痛及痛过敏的形成与脊髓水平伤害信息传递通路中初级传入纤维（Aδ、C纤维）末梢释放的兴奋性氨基酸（excitator amino acids，EAAs）及其受体的活动增强及表达上调有关。更进一步的研究表明，这种由于EAA受体活动所引起的慢性兴奋性突触后电位（EPSP）可同时伴随Ca2+内流导致细胞内Ca2+浓度升高，从而使一氧化氮合酶（NO synthase，NOS）活化。单独应用NO供体或NOS抑制剂可分别引起或阻断痛及痛过敏的形成。这种现象提示NO及NOS在痛及痛过敏的形成中发挥着重要作用。综合上述事实，可以认为在伤害性因素刺激下，脊髓伤害性信息传入神经元释放EAAs，通过EAA受体，使NOS活性增强或表达增高，NO生成增加引起痛及痛过敏。NOS作为一氧化氮（nitric oxide，NO）生成过程中的限速酶，在细胞浆中以两种形式存在，一种是依赖钙及钙调蛋白的固有型NOS，包括ncNOS和ecNOS，它们在受体激活后的短时间内（几秒到几分钟）发挥作用：另一种是由免疫反应诱发的诱导型NOS，能维持较长时间（几小时至几天）的NO释放。但是，尚无充分证据证明这一过程中NOS的表达增加，特别是尚无直接证据证明外周炎性痛及痛过敏过程中主要是何种类型的NOS表达增加。因此，本实验旨在观察甲醛炎症性痛及痛过敏过程中脊髓后角NOS通过免疫组织化 中文摘要学方法研究其类型及变化特点，并比较诱导型NOS抑制剂氨基肌MG)及非特异性NOS抑制剂L－NNA对甲醛炎性大鼠的痛阈的影响，以径探讨外周炎症性痛及痛过敏过程中是何种类型的NOS在起作用。研究如下：1大鼠甲醛炎症性痛及痛过敏时脊髓后角NOS的免疫组化类型及变化 将 30只 SD大鼠随机分为 5组：对照组、sh组、12h组J4h组J8h组，其中对照组动物右后掌皮下注射0 9％生理盐水0．lml，24h取材。实验组动物右后掌皮下注射2．5％甲醛O．I＊致炎症疼痛模型，并于注射后sh、12h、24h、48h分别取L。脊髓节段脊髓进行SP法免疫组织化学方法染色及HE染色，观测NOS的类型及变化。 结果发现，与对照组相比，实验组的L。脊髓节段HE染色后形态结构未见改变，细胞核内尼氏体清晰可见。实验组 nNOS 在脊髓后角 工一 IV板层神经元中持续表达o．01厂 并随时间的递增nNOS表达逐渐增多，两侧相比，注射部位同侧脊髓后角较对侧增加明显…州．05入实验组的脊髓后角iNOS 阳性细胞数目增加显著b川．01厂 且随时间的递增iNOS表达逐渐增多，24h达最高，两侧相比无明显差异u川．05人其中iNOS免疫反应强阳性产物主要定位于胶质细胞内，iNOS 阳性胶质细胞在脊髓前角、后角及导水管周围均有出现。 以上结果证明，甲醛炎症性痛及痛过敏过程中，脊髓后角 nNOS及州 OS的表达均有增加。另外，我们还证实iNOS有相对较高的表达上调。然而，与nNOS 卞对比，iNOS只发现于被激活的胶质细胞中。 2 中文摘要 2诱导型NOS 抑制剂氨基狐及非特异性NOS抑制剂L－NTNA 对甲醛炎性大鼠痛阈的影响 将30只SD大鼠，随机分为5组，每组6只，分别为 单纯甲醛组、AG（1）组、AG（2）组、L一NNA（l）组、L一NNA（2） 组。单纯甲醛组于动物右后掌单纯注射甲醛，测1期、11 期的痛阈：A以1)、AG枯组于动物右后掌注射甲醛前鞘内 给予特异性iNOS 抑制剂氨基叽，L－yA门)、L－NNA （） 组则于动物右后掌庄射甲醛前鞘内给予非特异性m 抑 制剂＊N＼A，J1期、11期的痛阈，AG＊组及卜NNA（2） 组则于注射甲醛后24h前再次鞘内分别给予抑制剂AG、 L－NNA，分别测24h段痛阈。用热板仪观测并记录不同时 段痛阈的变化。 结果发现，所有AG组及卜＼NA组足底注射甲醛后第 1期G’内)所测痛阈与单纯甲醛组无显著性变化 b川．of厂 第＊期O0’十0’)所测痛阈均明显升高 （p＜0．01），且“ 全较卜NNA组更显著（p＜0．01）。AGI) 组及LWNA门)组注射甲醛后24h痛阈与对照组无显著性 差异（P）0．05)，AGZ)组、L－yA（2）组注射 甲醛后 24h9 l｝Q均明显升高k①．01厂AG（2）组较卜MAQ)组涌阈升高 更明显（P＜0．01）。 以上结果表明，鞘内注射AG及L－NNA均能使痛阈升 高，且iNOS特异性抑制剂AG相对于非特异性抑制剂L－NNA 作用更显著，故可推知甲醛致痛后期脊髓节段主要以 i NOS 表达为主。 结论：大鼠后掌注射甲醛后能引起脊髓后角神经元内nNOS 及胶质细胞内iNOS表达增加，导致NO生成增多，痛阈下 3 中文摘要降。鞘内注射iNOS特异性抑制剂AG和非特异性NOS抑制剂L－NNA则能不同程度地抵消此种变化，且以AG的作用