小麦双单倍体诱导及优异新种质筛选

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小麦花药培养与小孢子培养作为单倍体育种中常用的两种方法,容易受到多种因素的影响,如小麦基因型、预处理方式、预处理时间以及培养基等,从而导致诱导率低、可育群体有限等一系列问题。通过小麦花药培养与小孢子培养可以有效缩短育种年限,快速获得能够稳定遗传的小麦新品系。将双单倍体育种与分子标记辅助选择技术有机结合,能够快速创制并获得含目标性状的小麦新种质和新品系。本研究利用F1代杂交组合比较了不同基因型、低温预处理时间和诱导培养基对小麦花药培养效率的影响,利用三个小麦品种研究了低温预处理时间和培养密度对小孢子培养效率的影响,以进一步提高单倍体诱导效率;通过HMW-GS功能分子标记对小麦双单倍体植株进行筛选和鉴定,以期为新品种的选育提供参考。主要研究结果如下:1、小麦花药培养中,对小麦离体幼穗进行不同时间的低温预处理(0d、6d、12d、18d),结果表明,在低温预处理12d时小麦愈伤组织诱导率(9.80%)和绿苗率(4.25%)达到最高;选用NPB-99培养基和癸培养基在18种F1代杂交组合上进行小麦花药培养,发现有13种供试材料在NPB-99培养基上表现出更高的小麦花药愈伤组织诱导率,并且绿苗分化率也相对较高。在18种供试材料中NPB-99培养基对愈伤组织的诱导效率(10.45%)是癸培养基(6.56%)的1.59倍,对绿色植株的诱导效率(3.00%)是癸培养基诱导效率(2.21%)的1.36倍,NPB-99培养基对小麦花药的培养效果优于癸培养基的培养效果。2、小麦小孢子培养中,将3个小麦品种(西农059、科农199和徐麦26)的根部分别放入蒸馏水和500mg/L的Cu SO4溶液中,经过12天的低温预处理后,发现浸泡在500mg/L Cu SO4溶液中的小麦材料其胚状体诱导率(6.04%)是置于蒸馏水中的(5.54%)的1.09倍,说明500mg/L的Cu SO4溶液能够促进小麦小孢子胚状体的形成。在培养密度为1×10~4/m L时,三种供试材料的胚状体诱导率达到最高(6.04%),在2×10~4/m L时胚状体诱导率最低(2.90%),三种小麦品种的小孢子培养最佳密度为1×10~4/m L。3、对84个小麦双单倍体材料从株高、亩穗数、穗粒数等方面进行农艺性状调查,发现各个品系的花培后代整体长势良好,部分材料在生长过程中存在病虫害现象(DH29-5)。每个株系的材料在田间长势一致,表明各品系之间的遗传性状已经纯合稳定。与亲本相比,各品系花培后代农艺性状差异显著。花培后代的株高变化幅度较大,最高为97.12cm,而最低为42.95cm,前者为后者的2.26倍。大部分花培后代的亩产量均在500kg左右,也有部分材料产量偏低(DH25-1、DH25-2)。4、对84个小麦双单倍体材料进行HMW-GS功能分子标记检测,筛选出同时具有2种亚基组合(1Dx5+1Dy10、1Bx7+1By8)的小麦材料为6种,初步推断其具有良好的小麦品质。在只具有其中一种亚基组合的28种材料中,筛选出株高适中且产量较高的小麦材料9种。通过分子标记检测结合农艺性状分析,将该15种材料作为小麦双单倍体新品系。本研究选用小麦F1代杂交组合进行花药培养,在获得新花培品系的同时,进一步提高了小麦的花培力,对小麦小孢子培养技术进行了探索,通过小麦HMW-GS功能分子标记筛选出了优质小麦双单倍体新种质,为小麦育种工作提供了参考。
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