论文部分内容阅读
早产儿脑白质损伤被认为是脑瘫发生的最主要危险因素。其病理特点主要包括反应性星形胶质化、髓鞘损害和轴突病变。早产儿脑白质损伤的机制尚不清楚，流行病学研究表明宫内感染在早产儿脑白质损伤的发生机制中起重要作用。本研究通过建立宫内感染的大鼠模型来探讨宫内感染是否会导致新生大鼠的脑白质损伤，同时研究宫内感染后脑组织中细胞因子的表达水平，探讨宫内感染与早产儿脑白质损伤的免疫学机制，为将来防治早产儿脑白质损伤提供理论依据。 目的 探讨宫内感染后胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、2’，3’-环核甘酸磷酸二酯酶(CNPase)和神经丝(NF)以及白介素-1β mRNA(IL-1β mRNA)和肿瘤坏死因子-α mRNA(TNF-α mRNA)在新生大鼠脑组织中的变化。 方法 14只孕15天SD-大鼠分为感染组(n=8)：通过大肠杆菌注入的子宫腔内建立宫内感染的动物模型，对照组(n=6)：子宫腔内注入等量生理盐水，两组分别于生后1、3及7天取新生大鼠脑组织。应用苏木素-伊红(HE)染色和免疫组化方法研究新生1、3、7日龄大鼠脑白质组织病理特点和GFAP、CNPase和NF的表达变化。RT-PCR法检测IL-1β mRNA和TNF-α mRNA在1、3、7日龄大鼠脑组织中的表达变化。 结果 14只母鼠接种后活动、进食均正常，无1例发生死亡。感染组子宫及胎盘病理检测见子宫壁及胎盘内血管充血、水肿，并见大量中性粒细胞浸润。对照组子宫及胎盘病理检测未见明显炎症反应。宫内感染后7日龄大鼠脑白质病理改变包括脑白质染色淡、结构疏松等，未见明显的凝固性坏死灶和囊状病变。感染组7日龄大鼠GFAP阳性细胞数在脑室旁白质和海马区明显多于对照组(脑室旁白质：9.73±3.55 vs 5.674±1.90，P＜0.05海马：7.81±3.61 vs 2.16±1.11，P＜0.05)；在胼胝体区两组比较差异无显著意义(2.894±1.73 vs 3.45±1.97，P＞0.05)。感染组7浙江大学硕士学位论文日龄大鼠脑室旁白质区和脐服体区CNPase阳性染色积分密度(ID)值明显减少，与对照组比较差异有显著意义(分别为:脑室旁白质:50.47士16.46 vs 71.77士13.24，P<0 .05;脱服体:22.51士6.09 vs 32.20士8.33，尸<0.05)。感染组7日龄大鼠脑室旁白质区NF阳性染色ID值明显减少，与对照组比较差异有显著意义(33.31士12.67vs 54.42士16.93，P<0.05)，而脐服体区两组比较差异无显著意义(20.59士5.48 vs25.38士6.16，P>0.OS)。感染组l日龄大鼠IL一1 p mRNA和TNF一。mRNA表达水平均增加，与对照组比较差异有显著意义(IL一1 pmRNA:0.83士0.19vs0.50士0.30，P<0 .05;TNF一a mRNA:0.74士0.30 vs 0.30士0.20，P<0.05)。3、7日龄大鼠IL一lp mRNA和TNF一Q mRNA表达水平两组比较差异无显著意义(P均>0.05)。结论宫腔内注入大肠杆菌能导致宫内感染的病理改变，宫内感染大鼠模型的建立是成功的。宫内感染能导致新生大鼠脑白质结构产生稀疏化表现，但未能导致明显的凝固性坏死灶和囊状病变。宫内感染能导致新生大鼠脑白质组织G队P、CNPase和NF的表达变化，提示宫内感染能导致新生大鼠脑白质损伤。而且宫内感染能导致新生大鼠脑组织IL一1 p mRNA和INF一a mRNA在生后早期有一过性变化的特点，提示他们在宫内感染导致新生儿脑白质损伤时的细胞因子级联反应过程中起重要作用。