一、研究目的、内容和意义1研究整理文献,寻找其病因病机和防治方药的脉络和规律,分析古今用药规律及各自特点,探求有效的防治途径和方法。2体外实验中,从Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达,对皂苷调控LoVo细胞凋亡作一探讨。3探讨猫爪草皂苷对移植性结肠癌小鼠模型(CT-26)的抗肿瘤作用及其诱导凋亡的相关机理。二、研究结果1文献研究1.1病因病机古代医家认为主要有饮食因素、起居不节、感受外邪、先天因素、情志因素等,且多数赞同本病是多种因素共同作用的结果。现代医家发展了大肠癌的病因病机理论,认为主要包括气滞学说、血瘀学说、热毒学说、湿聚学说、正气虚弱学说。1.2治法方药古代主要有补益虚损、理气活血、清热解毒、收涩止血、通下等法。今人则以清热解毒为主,温下法使用较少。古今用药各有侧重。补益虚损是古今医家在论治时均认识到的重要方法;今人治疗大肠癌,清热药占绝对优势,且温里药与古人用药相比有明显下降。2实验研究2.1猫爪草皂苷对人结肠癌细胞LoVo增殖呈明显抑制作用,且随药物浓度的提高和作用时间的延长而增强,500μg/mL72h其对LoVo抑制率为81.52%。2.2猫爪草皂苷作用人结肠癌细胞LoVo后,在荧光显微镜观察到细胞凋亡的特征形态改变,在流式图上各浓度组均见有亚二倍体峰的出现。24h出现DNA ladder。2.3猫爪草皂苷作用24h后,LoVo细胞Bax蛋白水平明显增高,而Bcl-2出现抑制,且呈浓度依赖性,皂苷组Bcl-2/Bax比例下降。Caspase-3蛋白水平随浓度明显升高。2.4猫爪草皂苷对小鼠移植性肿瘤CT-26有显著抑制作用。在本实验剂量范围内出现明显量效关系,其中最大剂量平均抑瘤率分别为39.97%,同时对荷瘤小鼠CT-26免疫器官胸腺、脾脏指数均有增加,NK细胞活性上升。Bax、Caspase-3蛋白水平明显升高,Bcl-2/Bax比值显著下降。三、研究结论1防治思路在于防治并举,防重于治;标本兼顾,祛邪寓扶正之中;以通为要,辨寒温各施温下、寒下;宜重视温下法的合理运用。2寒毒积滞是大肠癌类病证的主要病机之一。勿轻温热,重寒凉。温下法是治疗大肠癌的有效思路及方法。3猫爪草皂苷具有显著抑制人结肠癌LoVo细胞生长、诱导其凋亡的作用,具有时间、剂量依赖关系。猫爪草皂苷阻滞细胞周期,抑制肿瘤的生长。4猫爪草皂苷可降低人结肠癌LoVo细胞Bcl-2表达,增加Bax、Caspase-3表达。猫爪草皂苷可能通过压力诱导的途径,激活凋亡执行器Caspase-3诱导凋亡。5猫爪草皂苷抑制小鼠CT-26肿瘤的生长和诱导小鼠结肠癌细胞凋亡,其机理可能是下调Bcl-2的表达,上调Bax的表达。