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动物抗寄生虫药是指对动物体内或体外的寄生虫起杀灭或驱除作用的药物,根据其药物作用对象,抗寄生虫药可以分为驱线虫药、驱吸虫药、驱绦虫药、驱原虫药及驱外寄生虫药等多种类。在抗寄生虫药发挥良好驱寄生虫和(或)杀寄生虫的药理作用的同时,也给食品安全带来了威胁。动物抗寄生虫药物的不当使用带来的食品中残留对人体造成直接的或通过环境和食物链的作用间接的产生急、慢性毒性作用,此外还会引起寄生虫耐药性增强、影响养殖业的发展等后果。因此包括我国的许多国家和地区都针对部分抗寄生虫药物制定了最高残留限量或者禁用。然而开展残留分析研究和制订兽药残留检测方法,加强动物源性食品兽药残留监控,是食品安全控制中重要的一环。目前,兽药残留监控手段向着快速、简便、高通量、高效率的趋势进行,逐渐发展为先筛选再定量确证的监控程序。而目前新近报道的动物源性食品抗寄生虫药物残留的检测方法中,尚没有筛选方法的报道,定量确证方法的报道中涉及的药物数量方面,也仅有三十多种,尚不够全面;在监控基质方面也仅包括肝脏、牛奶等单一种类的基质,没有做到全面监控。因此,本研究针对动物性食品中动物抗寄生虫药物残留,顺应残留分析高通量、高效率的发展趋势,建立了动物源性食品中抗寄生虫药物残留检测的筛选检测方法,采用QuEChERS前处理技术,节省样品前处理时间,提高监控分析检测效率,为抗寄生虫药物的残留监控提供技术支持和理论依据,完善了动物源性食品中抗寄生虫药物的残留监控体系,并为动物源性食品安全评价提供指导和参考。
本研究建立了猪、鸡、牛、羊的肌肉、肝脏、肾脏,鸡蛋,牛奶,蜂蜜,鱼肉中多种类动物抗寄生虫药物及代谢物的样品前处理方法和高效液相色谱-串联质谱筛选检测方法。样品采用改良的QuEChERS前处理技术,采用乙腈和乙酸乙酯重复提取,提取液采用分散固相萃取法净化,通过对几种常用吸附剂(PSA,NH2,GCB,ODS)吸附杂质和药物能力的考察,最终选择了各项条件最优的ODS吸附剂,净化后取上清液,加入1mL DMSO于40℃条件下氮气浓缩至1mL,HPLC-MS/MS上样检测;采用C18反相色谱柱分离,流动相中的水相为12.5mM甲酸铵水溶液,有机相为12.5mM甲酸铵-甲醇∶乙腈(50∶50,v∶v)溶液,梯度洗脱,保证所有药物在40min内保留时间分离良好;在最优的质谱参数条件下,根据优化出的各药物的定性定量离子,MRM模式下正、负离子扫描监测。结果显示:各类抗寄生虫药物在组织和产品中的最低检测限为0.5-10μg/Kg,最低定量限为1-20μg/Kg;针对以MRL为VL的药物,98%以上的药物的CCβ在2倍VL以内;针对所有药物,约60%药物的CCβ在3倍VL以内。经对照,各药物的检测限和定量限均低于欧盟最新规定的最高残留限量,符合筛选方法对灵敏度的要求。在动物组织及产品中,阿维菌素类药物的回收率为32.9%-60.1%,变异系数≤20.6%;苯并咪唑类药物回收率为44.3%-83.6%,变异系数≤21%;聚醚类离子载体抗生素药物的回收率为29.6%-60.0%,变异系数≤19.9%;化学合成抗球虫药物的回收率为34.2%-71.0%,变异系数≤22.0%;杀虫剂类药物的回收率为29.5%-76.9%,变异系数≤26%;其他抗寄生虫药物的回收率为32.0%-75.2%,变异系数≤20.9%。方法考核结果表明该方法符合兽药多残留筛选的要求,可用于动物性食品中抗寄生虫药物及杀虫剂残留的筛选。
本研究首次建立了鸡、牛、羊、猪的肌肉、肝脏、肾脏,鸡蛋,牛奶,蜂蜜,鱼肉中多种类常用动物抗寄生虫药物的样品前处理方法和高效液相色谱-串联质谱筛选检测方法。本研究涉及的样品基质范围广,药物种类多,达到了筛选方法高通量的要求;并采用了系统的QuEChERS样品提取净化方法,有效节省分析时间,节约成本,提高回收率;在大量样品的残留筛选上有明显优势。本研究丰富了兽药残留筛选检测方法,完善了动物性食品中兽药残留监控体系。