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背景与目的子宫内膜癌是常见的妇科恶性肿瘤,约占女性肿瘤患者的7%,且近年来其发病率有上升趋势,严重危害女性健康。但是该病的发病机制目前仍然不确切,仅证明肥胖、糖尿病、高血压及多囊卵巢综合征(PCOS)等与其发病高度相关。肥胖特别是上腹部肥胖是子宫内膜癌的危险因素,已得到流行病学研究的支持。肥胖者体内脂肪组织可分泌较多的脂肪因子,但是仅有脂联素的水平却较正常人低。同时研究表明血浆中的脂联素水平与子宫内膜癌呈负相关。而且脂联素通过与其特异性受体结合,进而抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,这提示它有抗肿瘤的作用。脂联素基因启动子上游存在丰富的转录因子结合位点,FOXO1(叉头框蛋白O1)能通过结合C/EBP(CCAAT增强子结合蛋白)增强脂联素基因的转录。近年来研究发现,2型糖尿病的一线治疗药物二甲双胍可纠正患者体内胰岛素抵抗状态,进而影响子宫内膜癌的发生和发展,而这一作用是通过AMPK信号通路实现的。因此,本课题拟探讨在子宫内膜癌细胞系HEC-1A和Ishikawa中,二甲双胍能否通过AMPK/m TORC1增加FOXO1的水平进而增加脂联素的表达,为子宫内膜癌的诊治提供新的思路。材料本文以子宫内膜癌细胞系HEC-1A(中分化)和Ishikawa(IK,高分化)为实验对象。两个细胞系均由魏丽慧教授(北京大学人民医院妇产科实验室)惠赠。分别用含10%胎牛血清的DMEM-高糖和DMEM/F12培养基,置于37℃、5%CO2培养箱中培养。细胞系常规传代。方法1.CCK-8检测二甲双胍以不同浓度作用不同时间后,子宫内膜癌细胞系HEC-1A和Ishikawa的增殖率变化;2.RT-PCR检测二甲双胍不同浓度处理HEC-1A和Ishikawa后,脂联素m RNA表达水平的变化;3.Western Blot检测不同浓度二甲双胍作用HEC-1A和Ishikawa后,FOXO1和脂联素蛋白表达水平的变化。结果1.HEC-1A和Ishikawa细胞系经过0 mmol/L、10 mmol/L、15 mmol/L、20mmol/L、25 mmol/L、30 mmol/L浓度的二甲双胍处理24小时后其增殖率均呈下降趋势,FHEC-1A=57.74,PHEC-1A<0.05,FIshikawa=121.63,PIshikawa<0.05,各组之间差异均有意义,且呈浓度依赖性;2.经过0 mmol/L、10 mmol/L、15 mmol/L、20 mmol/L、25 mmol/L、30 mmol/L浓度的二甲双胍处理24小时后,RT-PCR检测到HEC-1A和Ishikawa细胞系中脂联素m RNA的表达水平随着二甲双胍浓度的增加均先增加后下降,在二甲双胍浓度为20 mmol/L左右达到最大值,各组间比较,均有P<0.05,差异均有统计学意义;3.经过0 mmol/L、10 mmol/L、15 mmol/L、20 mmol/L、25 mmol/L、30 mmol/L浓度的二甲双胍处理24小时后,Western Blot检测HEC-1A和Ishikawa细胞系中脂联素、FOXO1蛋白的表达随着二甲双胍浓度的增加而升高,各个浓度间比较,P<0.05,差异均有统计学意义。结论二甲双胍能抑制子宫内膜细胞的增殖并呈剂量依赖型,并增加子宫内膜癌细胞中脂联素m RNA和蛋白的表达水平,其作用机制可能与FOXO1含量被上调有关。