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犬乳腺肿瘤(CMT)发病率高,分类复杂,为提高CMT诊断的准确性,使用免疫组织化学方法,结合常规的组织学诊断,对收集的48例CMT进行免疫组织化学标记物PCK、CK5/6、CK8/18、a-SMA、Calponin、P63、Vimentin、Ki-67和PCNA染色,通过染色结果,来评估这些标记物在CMT诊断中的应用。48例CMT诊断结果为:良性乳腺肿瘤29例,其中腺瘤2例,纤维腺瘤2例,导管腺瘤4例,导管内乳头状瘤3例,复杂瘤8例,混合瘤8例,导管腺瘤伴鳞状分化2例;恶性乳腺肿瘤19例,其中粉刺癌3例,筛状癌1例,导管癌1例,管状乳头状癌1例,复杂癌1例,混合癌3例,恶性肌上皮瘤4例,癌肉瘤1例,骨肉瘤1例,软骨肉瘤1例。应用PCK、CK5/6、CK8/18、a-SMA、Calponin、P63的免疫组织化学染色发现,3例粉刺癌的癌细胞成分不同,一例癌细胞来源于乳腺腔上皮细胞;另两例粉刺癌的癌细胞来源乳腺肌上皮细胞。研究结果表明免疫组织化学染色可以更精确地诊断出肿瘤的瘤细胞来源。对48例CMT中的8例复杂型和8例混合型肿瘤的IHC染色结果进行分析发现,PCK、CK5/6、CK8/18均表达于腔上皮细胞,PCK、CK5/6、a-SMA、Calponin、P63、Vimentin均表达于基底型肌上皮细胞,PCK、CK5/6、a-SMA、Calponin、P63逐渐减少在间质型肌上皮细胞中的表达,Vimentin在各类型肌上皮细胞中强阳性表达并表达于混合型肿瘤中的骨或软骨成分,说明在复杂型和混合型肿瘤中的肌上皮细胞发生了间质转化,在转化过程中逐渐失去肌上皮细胞的特性并增加间质细胞的特性。对48例CMT中a-SMA、Calponin、P63的表达进行分析发现,有11例肿瘤的肌上皮细胞P63阳性表达,部分Calponin阳性表达,a-SMA均为阴性表达,此研究结果表明a-SMA和Calponin不适合单独作为识别肌上皮细胞的标记物,P63较aSMA、Calponin更适合作为CMT中肌上皮细胞的标记物。本研究中28例瘤旁组织的免疫组织化学染色显示,在瘤旁组织中CK5/6在导管的腔上皮细胞、基底细胞以及腺泡的肌上皮细胞中阳性表达,而在腺泡的腔上皮细胞为阴性表达,CK8/18在导管和腺泡的腔上皮细胞表达阳性。此结果表明CK5/6和CK8/18联合应用可以区分乳腺导管的腔上皮细胞和腺泡的腔上皮细胞。对Ki-67和PCNA在48例犬乳腺肿瘤中的表达进行分析发现,PCNA在良性和恶性CMT中的表达均高于Ki-67的表达,在部分肿瘤中其阳性率高达90%以上,PCNA在良性与恶性CMT中的表达差异不明显,Ki-67在良性与恶性CMT中的表达存在显著性差异,说明Ki-67增殖指数可用于CMT良恶性判断的标志之一。