大豆疫霉根腐病又称大豆疫霉根茎腐病、枯萎病,病害由大豆疫霉菌(Phytophthora sojae Kaufmann&Gerdemann)引起。Harpins可以诱导植物的过敏性反应(hypersensitive reaction, HR), HIN1(harpin-induced1)是Harpi诱导表达的蛋白之一,HIN1在植物中可诱导抗病,但是目前还未见大豆HIN1的报道。本研究首次在课题组以高抗大豆品种“绥农10"为试材构建的受疫霉菌诱导后差异表达的cDNA消减文库的基础上,选取了文库中一条经本地Blast比对后发现与拟南AtNHL3(Gene Accession no.BT000871.1)具有较高同源性的高上调表达的EST序列；本研究用RT-PCR技术从“绥农10”中分离出基因全长序列,是大豆中的新基因,命名为GmHinl。通过生物信息学工具对DNA序列及其编码的蛋白序列进行分析；利用实时荧光定量PCR分析表达情况,具体研究结果如下：1. GmHinl基因的cDNA全序列为871bp,开放阅读框(ORF)为651bp,编码216个氨基酸,并且含有HIN1保守结构域LEA-2。它为疏水性蛋白质,理论等电点(pI)为9.63,估计分子量为24.48KDa。同源序列比较发现,大豆Hinl基因编码氨基酸序列与烟草NtHIN1(CAA68848)、烟草NtHIN2(BAC15623)、马铃薯StHIN1(AAN52931)编码的推测蛋白氨基酸序列同源性较高,由高到低依次为烟草NtHIN1(57%)>烟草MHIN2(56%)>马铃薯StHIN1(55%).2. Real time-PCR表明,Hinl基因在大豆根、茎、叶中均表达,在根和叶片中表达较强,在茎中表达微弱；Hinl基因的表达受疫霉菌、外源激素茉莉酸(JA)、水杨酸(SA)、赤霉素(GA3)和脱落酸(ABA)诱导。GmHinl在非生物因素胁迫下为上调表达,对机械损伤处理应答最为敏感,其次为干旱处理,最后为低温胁迫。3.构建了GFP融合表达载体pCAMB1A1302-Hinl,利用基因枪法轰击洋葱表皮细胞,结果表明Hin1基因表达蛋白主要分布在细胞膜中。4.构建了pCAMBIA3301-Hinl植物过量表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草叶盘,经PCR扩增检测,获得阳性植株19株T0代植株。对转基因烟草阳性植株接种烟草疫霉,结果表明与非转基因烟草相比抗性增强。