细胞外基质是动物组织细胞外为细胞提供一个细胞外网架,在组织中或组织之间起支持作用的部分。此外,它还具有其它很多重要的功能。细胞外基质的主要成分有蛋白聚糖,糖蛋白,胶原等。Versican是一种属于lectican家族的大型硫酸软骨素蛋白聚糖。通过选择性拼接,versican存在至少四种单体V0,V1,V2,V3。结构上而言,versican包括两个球蛋白结构域和一个硫酸软骨素结合序列,即N端的G1区和C端的G3区及CS序列。CS序列可以分为两种选择性拼接结构域,即CSα和CSβ。V0包含CSα和CSβ；V1仅包含CSβ而V2包含CSα；V3则没有CS区。Versican分布非常广泛,它与发育及组织损伤都有关系。现有研究显示versican可以影响细胞黏附、迁移、增殖和分化等。 本研究中,首先克隆了人versican V1基因及它的两个突变体。一个是缺失CSβ区域的mute-V3;另一个是缺失G3区域的mute-G3。构建的真核表达载体pcDNA3.1-V1瞬时转染到293T细胞中以证明它们可以在胞内进行有效地转录。它为进一步研究人类versican V1基因的功能及其作用机制奠定了基础。 接着,为了研究versican在细胞内的功能,本研究利用有效的RNA干扰系统一-pSUPER系统来构建小干扰RNA系统。已构建了五种不同的siRNA,其中pSUPER-841和pSUPER-2101干扰versican的G1区；pSUPER-3901干扰CSα区；pSUPER-5941干扰CSβ区；pSUPER-10381干扰G3区。这为研究versican不同结构域和不同单体的功能提供了一个有效的工具。 最后,我们相继利用RT-PCR的方法检测了在不同细胞中versican各单体的表达情况,包括293T细胞、NIH3T3细胞、HPF-1细胞及间充质干细胞并发现versican在这些细胞中的表达各不相同,且在同一细胞的不同生长时期它的表达量及单体类型也会发生变化。