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人类呼吸道合胞病毒（Human Respiratory syncytial virus, RSV）是有包膜的非节段性单股负链RNA病毒，属副粘液病毒家族中的肺炎病毒属，是世界范围内婴幼儿下呼吸道感染的重要病原。近10年来发现RSV在成人人群中有一定分布，在虚弱的老年人、有心肺基础疾患和免疫抑制的成人中有较高的发病率和病死率。M2-1基因全长595个核苷酸，具有保守性，编码22KD的蛋白，M2-1蛋白是RSV区别于其他副粘病毒所特有的一种非糖基化结构蛋白，目前研究证实M2-1蛋白与病毒的衣壳成分有关，同时M2-1蛋白具有抑制多聚酶终止于基因终止信号和跨过基因间区继续转录的功能，是基因连接处转录通读不可缺少的因子，被称为转录延长因子，在病毒的复制和调节过程中起重要的作用。陈杭薇等在研究成人呼吸道感染过程中发现肺癌患者RSV的检出率比其他肺部疾病患者高；应用RT-PCR技术从肺癌手术标本中扩增出RSV N基因片段，同时检测手术标本中K-ras基因突变，发现二者具有显著的一致性。将对RSV自身的转录和复制起重要调控作用的转录因子M2-1基因转染人肺癌PAa细胞后，该基因在宿主细胞的表达可促进宿主细胞生长。以上提示RSV可能与肺癌的发生发展存在一定关系。国内外有关RSV与肺癌关系的研究尚未见报道。目的：1. 本实验首先观察RSV感染阳性的肺癌组织中P16、P53、P21蛋白表达情况，旨在探讨RSV感染对癌基因和抑癌基因表达的影响；2.转染并建立稳定表达M2-1基因的人肺PAa细胞；3.观察转染后细胞增殖活力、细胞凋亡、药物敏感性等生物学特性改变；4.观察转染后细胞形态及超微结构改变；进一步阐明M2-1基因在肺癌发病过程中的作用和可能机制。为RSV在肺癌的发生发展中可能的作用寻找依据，为进一步探讨RSV 与肺癌发生的关系开拓新思路。 方法:1.免疫组化技术检测肺癌手术标本P16、P53、P21蛋白的表达情况；2.脂质体法转染肺癌PAa细胞，G418筛选阳性克隆；应用RT-PCR、免疫组化等方法检测M2-1基因表达；3. MTT法、流式细胞技术、药物敏感性检测、诱导细胞凋亡,进一步观察M2-1基因转染后对PAa细胞增殖和细胞活力的影响；4.倒置显微镜、透射电镜技术观察转染后人肺癌PAa细胞形态和超微结构改变； 结果：1.p53在肺癌标本中有较高表达。RSV感染的肺癌手术标本中p53、p16、p21蛋白表达与对照组差异无明显意义。2.建立成功表达M2-1基因的PAa/M2-1细胞；3. M2-1基因的表达可以促进体外培养的PAa/M2-1细胞生长，表现在PAa/M2-1细胞集落形成率增高，且集落细胞数增多；细胞贴壁能力下降；PAa/M2-1细胞S期细胞数减少，G２/M期增加；在不同浓度MMC作用下转染后的细胞存活率下降，对MMC的敏感性增强；4.电镜观察到转染后的细胞膜微绒毛明显减少、细胞器稀少、核浆比例增大，核仁巨大并可见核畸形和怪异核，转染后的细胞明显向低分化发展。结论： <WP=8>1. p16、p21可能作为判断肺癌分期及预后的辅助指标。RSV感染对肺癌组织细胞癌基因无明显影响。2．建立了稳定表达M2-1基因的重组PAa/ M2-1细胞。3. M2-1蛋白可促进PAa细胞体外生长。表现为增殖活跃、细胞粘附功能下降、药物敏感性增强、并有自发性凋亡发生。4．超微结构显示转染后的细胞向幼稚、低分化发展。为进一步研究RSV与肺癌发生发展的关系提供了新的证据和思路。