藏柴胡与北柴胡的鉴别与药理活性对比研究

来源 :山西省中医药研究院 | 被引量 : 3次 | 上传用户:jonquil1981
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目的:以北柴胡(产地:万荣WB)为参照药材,对目前市场流通的不同产地的藏柴胡(产地:甘肃GZ;万荣WZ)进行药材性状、显微、理化、主要化学成分、安全性、药理活性等多方面系统比较研究,阐明其作为柴胡药材使用的可能性和可靠性,并为临床应用提供科学依据。方法:1藏柴胡与北柴胡的鉴别与主要化学成分的比较对藏柴胡进行性状、显微(横切面、粉末)、理化(薄层)鉴别,描述其具体特征,并以北柴胡为对照,总结归纳藏柴胡与北柴胡的鉴别要点。按照2015版《中国药典》柴胡药材项下方法,测定柴胡的灰分、浸出物内容,比较藏柴胡与北柴胡柴胡皂苷a(SSa)、柴胡皂苷d(SSd)的含量差异,综合考察藏柴胡与北柴胡的差异。2藏柴胡与北柴胡小鼠急性毒性及其SSa、SSd的成分比较分别制备GZ、WZ、WB水提组与醇提组,按照最大给药量试验方法,以最大浓度、最大体积40ml/kg,小鼠灌胃给药,1日两次,比较GZ、WZ、WB水提物、醇提物的毒性大小,得出最大给药量,同时计算相当于人临床用药的倍数。测定SSa、SSd含量,进一步探索柴胡毒性与SSa、SSd成分的关系。3藏柴胡与北柴胡主要药理活性的比较解热作用:采用背部皮下注射2,4-二硝基苯酚溶液(12.5mg/kg)制备大鼠发热模型,设立空白、模型、阿司匹林阳性(50mg/kg)、GZ、WZ、WB低、高剂量(1.25g/kg、5g/kg),共9组,灌胃给药,连续4天,造模后每40min测肛温1次,连续测定6次,根据温度变化比较其解热作用强弱。抗炎作用:采用二甲苯20μl涂抹小鼠右耳上下两面制备耳廓肿胀模型,设立模型、地塞米松阳性(0.9mg/kg)、GZ、WZ、WB低、高剂量(5g/kg、10g/kg),共8组,灌胃给药,连续5天,造模后根据左右耳片重量差异,计算肿胀度和肿胀抑制百分率,比较其抗炎作用强弱。保肝作用:采用腹腔注射CCl4(0.1%)植物油溶液制备小鼠急性肝损伤模型,设立空白、模型、联苯双酯阳性(7mg/kg)、醋制GZ、WZ、WB低、高剂量(5g/kg、10g/kg),共9组,灌胃给药,连续7天,造模后根据血清生化指标(AST、ALT),肝组织生化指标(SOD、MDA),病理组织学观察等比较其保肝作用强弱。结果:1藏柴胡与北柴胡的鉴别与主要化学成分的比较(1)性状主要鉴别点为断面特征:GZ:断面纤维性强(木化),可见放射状纹理,多有空心。WZ:断面略显纤维性,可见放射状纹理,形成层呈环。WB:断面呈片状纤维性,皮部浅棕色易脱落,可见形成层呈多环状排列。(2)横切面与粉末显微主要鉴别点:GZ:木栓层较薄,且韧皮部油管较少,木质部的所占比例宽广,纤维性较强;WZ、WB导管排列方式不同,WZ导管径向排列,WB导管切向排列,其余相似。GZ、WZ、WB无明显的粉末鉴别特征点。(3)薄层色谱:WZ与WB的结果比较一致,与柴胡对照品,对照药材的展开结果也比较一致;GZ与WB比较,斑点亮度与大小均强于WB,且主斑点多于WB。(4)灰分、浸出物结果:GZ、WZ、WB无明显差异。(5)含量测定:GZ、WZ、WB的SSa、SSd含量由高到低分别为GZ(0.967%)>WZ(0.640%)>WB(0.445%)。2藏柴胡与北柴胡小鼠急性毒性及其SSa、SSd成分的比较(1)柴胡最大灌胃给药后能抑制小鼠体重增长,与空白组比较,GZ醇提组、WB醇提组有极显著性差异(P<0.001),GZ水提组有非常显著性差异(P<0.01),WB水提,WZ醇提组呈显著性差异(P<0.05)。(2)GZ、WZ、WB不同提取物SSa、SSd含量结果:醇提组GZ(0.537%)>WB(0.208%)>WZ(0.195%),水提组GZ(0.114%)>WB(0.089%)>WZ(0.081%)。3藏柴胡与北柴胡主要药理活性的比较(1)GZ、WZ、WB的水煎液均能降低发热大鼠体温,与模型组比较,GZ高剂量的作用最强,IRI最低,GZ低剂量作用最弱,IRI最高,且各实验组之间无显著性差异。(2)GZ、WZ、WB的水煎液对小鼠耳廓肿胀均有一定程度的抑制作用,与模型组比较,GZ低剂量组有非常显著的差异(P<0.01),WZ、WB高剂量组与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。(3)小鼠预服WZ、WB能够有效缓解CCl4诱发的肝组织病变,降低血清ALT、AST含量,肝组织中MDA含量,并增强SOD活性,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),GZ无显著性差异(P>0.05)。结论:1药材性状:断面特征,横切面的油管数量,导管排列方式可作为GZ、WZ、WB性状、显微横切面的主要鉴别点,薄层色谱可对GZ进行鉴别。藏柴胡的SSa、SSd含量均高于北柴胡,且GZ含量最高。2 GZ、WZ、WB急性毒性大小为:醇提组:GZ>WB>WZ,水提组:GZ>WB>WZ,且醇提组大于水提组。且柴胡毒性大小可能与SSa、SSd呈量效关系。3 WZ在解热、抗炎、保肝方面的作用接近WB,作为柴胡使用的可能性较大;GZ虽然在解热、抗炎方面的作用强于WB,但保肝作用不明显,因此GZ能否作为柴胡使用仍有待研究。
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