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化疗是临床上治疗癌症的常见方法,但由于肿瘤细胞多药耐药性（multidrug resistance,MDR）的不断出现,严重地影响了药物治疗效果,最终导致治疗失败。在引起MDR产生的众多机制中,对P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gP）的研究是目前最广泛的。P-gP可以将药物泵到细胞外,使得药物不能有效的传递到细胞内部药物作用靶点上,不能抑制肿瘤细胞的增殖。阳离子抗菌肽（cationic antimicrobial peptides,cAMPs）由于其独特的作用机制和显著的肿瘤细胞选择性,受到人们的关注,并成为当前抗肿瘤药物研究热点。阳离子抗菌肽L-K6是以中国林蛙皮肤分泌物中提取得到的天然抗菌肽Temporin-1CEb为模板,根据阳离子性、两亲性以及特殊氨基酸结构特点等改造而成,含有13个氨基酸残基,7个净正电荷,并呈现两亲性α-螺旋结构。本文主要就L-K6对乳腺癌耐药细胞MCF-7/Adr耐阿霉素作用的影响及作用机制展开了初步的探讨。MTT实验检测了L-K6对MCF-7/Adr的抗肿瘤活性,结果表明L-K6对MCF-7/Adr IC50（59.2μM）比对敏感乳腺癌细胞MCF-7的IC50（37.6μM）高,说明单独使用L-K6对MCF-7/Adr作用效果不明显。阿霉素（doxorubicin,DOX）是临床上常见的化疗药物,对MCF-7的IC50（5.33μM）明显低于对MCF-7/Adr的IC50（258.2μM）,相差近50倍。说明单独使用L-K6和DOX,其抗肿瘤活性均会不同程度受到多药耐药机制的影响。但当L-K6和DOX联合使用,则发现当肽浓度10、30、50μM时,DOX的抗肿瘤活性均明显增加,同时DOX荧光强度明显增强并进入到细胞核内。其中以30μM L-K6与60μM DOX合用的效果最佳,合用指数高于1.15,说明L-K6和DOX可以通过协同方式降低MCF-7/Adr细胞耐药性,发挥抗肿瘤作用。MCF-7/Adr细胞膜通透性的实验结果表明,L-K6作用1h对细胞的膜电位和通透性没有明显的影响,作用24h,且L-K6浓度大于30μM时,MCF-7/Adr细胞膜的通透性有所增加。此外,L-K6对P-gP功能的影响研究表明30μM L-K6可以激活P-gP ATPase活性,明显增加阿霉素和罗丹明123在细胞内的积累,说明L-K6可以降低P-gP的外排功能。同时L-K6对P-gP表达的影响研究表明30μM L-K6能够明显抑制P-gP的表达。综上所述,L-K6和DOX能够在较低浓度下协同抑制MCF-7/Adr细胞增殖,可能与L-K6增加膜通透性,有利于DOX进入细胞作用细胞内靶点有关;同时L-K6能够抑制P-gP外排功能及表达,进一步使MCF-7/Adr细胞耐药性降低。