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半乳聚糖存在于高等植物的所有组织中,与半纤维素、木质素等多糖组成植物的细胞壁与木质部。研究发现低聚半乳聚糖具有良好的生物活性,因此获得高效、专一的降解半乳聚糖的酶具有重要意义。根据半乳聚糖连接键型的不同,水解半乳聚糖的酶主要分为β-1,3、β-1,4和β-1,6三种半乳聚糖酶。本文通过分子克隆手段获得了一种专一性的内切-β-1,6-半乳聚糖酶,主要研究结果如下:（1）本论文通过PCR从草酸青霉菌获得编码糖苷水解酶家族30（GH30）的基因pogal6。其基因大小为1464 bp,含有487个氨基酸。将目的基因pogal6分别与细菌表达载体pET-32a（+）及真菌表达载体pPIC9K连接,并成功在大肠杆菌（Rosetta-gami B（DE3）pLysS）以及毕赤酵母（GS115）中表达目的蛋白Po Gal6-R及PoGal6-G。（2）研究了重组酶PoGal6的基本酶学性质。使用pNPβGal作为底物测定PoGal6的活性。结果表明:纯化后的目的蛋白最适pH为6.0,在pH 3-7之间仍保持60%以上的活性;最适反应温度为40oC,在50oC下100 min内仍能保持40%以上的活性;在5 mM金属离子缓冲体系中,Hg2+完全抑制PoGal6的活性,Ca2+将PoGal6的活性提升至143%。以RB5-dGA为底物检测PoGal6降解半乳聚糖的活力,结果表明:PoGal6-R的酶活力为35.2 U/mg,PoGal6-G的酶活力为2.52 U/mg。（3）研究了重组酶降解植物半乳聚糖的能力。离子色谱分析及甲基化分析表明:原核表达的重组蛋白PoGal6-R是目前已报道的内切-β-1,6-半乳聚糖酶中活力较高的一种糖苷水解酶。其可以专一性水解β-1,6键连接的半乳聚糖,同时对不同分子量的半乳聚糖均具有不同程度的水解能力。本研究首次从草酸青霉中获得重组酶PoGal6,并对其酶学性质及功能进行详细研究,为制备系列活性半乳寡糖和多糖结构分析奠定了理论基础。