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[目的]
构建与人体临床证候最接近的湿热型溃疡性结肠炎大鼠模型,探讨该模型的客观指标评价体系;在造模成功的基础上,探讨不同剂量黄芩汤对该模型调节性T细胞功能的影响,从自身免疫调节的角度研究该方治疗该模型的免疫学机制。
[方法]
采用灌服猪油、白酒并自由饮用蜂蜜水的方法,造成大鼠湿热体质;在此基础上用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)和乙醇混合液灌肠诱发湿热型溃疡性结肠炎,观察大鼠证候学、结肠病理学及免疫学指标血清白介素-6(IL-6)的改变,判定造模是否成功。造模成功后初步为该模型建立证候学、病理学及免疫学三大指标评价体系。
在成功造模的基础上,分别运用大中小剂量黄芩汤、白头翁汤、柳氮磺吡啶(SASP)混悬液、生理盐水对模型大鼠进行干预,观察证候学、病理学的改善情况,并检测与调节性T细胞功能密切相关的血清细胞因子白细胞介素10(IL-10)及转化生长因子β1(TGF-β1),用实时PCR法检测转录因子Foxp3 mRNA的表达含量,比较以上药物在影响调节性T细胞功能方面的作用。
[结果]
造模大鼠出现粘液便、懒动、食欲减退、体重下降等湿热证候,疾病活动度(DAI)比空白组高(P<0.05);病理切片可见结肠粘膜出现明显溃疡,病理学评分有显著性差异(P<0.01);免疫学指标血清IL-6明显升高(P<0.01)。
经过药物干预,各组大鼠的证候学及病理学有不同程度的改善,以黄芩汤中剂量治疗组最明显。在免疫学指标方面,各治疗组大鼠血清IL-10、FGF-β1及结肠组织Foxp3 mRNA在治疗后有不同程度的回升,仍以黄芩汤中剂量组明显,且效果优于阳性对照药白头翁汤及SASP(P<0.05,0.01)。
[结论]
采用高脂高糖辛辣饮食加化学刺激法可以构建出理想的湿热性溃疡性结肠炎大鼠模型。采用证候学、病理学及免疫学三大指标评价该模型具有科学性。
黄芩汤对该模型证候及病理学具有理想的改善作用,且对Tr细胞功能具有上调作用,均以中剂量效果最优,且效果优于阳性对照药白头翁汤及SASP,其机制可能是通过上调IL-10、TGF-β1及Foxp3基因的表达含量实现的。