日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)系甲壳动物,是我国沿海重要的经济养殖种类。其性别控制是水产遗传育种的研究热点。目前人们对包括虾蟹在内的甲壳动物性腺差异的分子机制仍认识有限,因此研究对虾精巢、卵巢差异表达基因具有重要的理论意义和应用前景。退火控制引物技术(annealing control primer)是一种在mRNA差异显示PCR( mRNA differential display PCR)基础上发展起来的克隆差异表达基因的新方法。本研究利用ACP技术,选择20对ACP随机引物分别对日本囊对虾精巢和卵巢cDNA进行扩增,获得8个差异基因。其中凝血酶敏感蛋白基因(thrombospondin)和皮质棒蛋白基因(cortical rod protein-2)是卵巢显著表达的基因。增殖细胞核抗原基因(proliferating cell nuclear antigen)和泛素缀合酶基因(ubiquitin-conjugating enzyme 2r)在精巢表达量高于卵巢的基因。其余基因为未知基因。RACE技术获得增殖细胞抗原基因和泛素缀合酶基因的cDNA序列全长,序列分析显示增殖细胞抗原基因cDNA序列包括923个碱基,其中包括75 bp的5’端的非编码区(5’untranslated region )。783bp的开放阅读框(open reading frame),65 bp的3’的非编码区(3’untranslated region )(除去polyA部分),该开放阅读框编码260个氨基酸序列。泛素缀合酶基因cDNA序列全长为1477 bp,包括651 bp的5’的非编码区,85 bp的3’的非编码区(除去polyA部分),以及一个编码241个氨基酸的开放阅读框。荧光定量PCR分析证实了ACP技术所获得的结果并进一步发现了各个差异基因在精巢和卵巢的不同发育阶段的表达特点,各个基因在精巢和卵巢的发育过程中变化显著,说明这些基因在性腺发育过程中起着重要的作用。