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酶生物传感器是检测生物物质或其他有毒害物质的重要手段,主要依赖于酶的活性位点与目标分析物之间特异性的生物识别过程,来实现对特定目标物的快速识别和检测。有效的酶生物传感系统可以应用于食品工业、环境监测和临床医学等多个研究领域,因此,制备出快速,简便,灵敏的酶生物传感器来实现对目标物质的实时监测和测定有着十分重要的作用。双酚A作为一种环境雌激素,对人体的生殖系统,脑神经系统和免疫系统等会造成不良影响。BPA大量存在于我们周围,同时在日常生活中,极易接触到此类物质。所以对双酚A的监测受到了普通大众的关注。本论文的研究工作主要是将新型的纳米材料和酶(酪氨酸酶)相结合,用于电化学酶生物传感器的研制中。研究思路表现为:(1)利用酪氨酸酶对双酚A的特异性响应,研制出有着较好选择性及较高灵敏度酶生物传感器;(2)以Au-Ni材料和其他活性材料作为修饰电极基底的材料,借助不同的酶修饰手段,制备出电化学酶传感器,并对传感器机制及目标响应进行研究。本论文研究内容包括以下几个部分:(1)合成新型Au-Ni复合材料,通过壳聚糖的粘合作用,将壳聚糖和Au-Ni复合材料修饰到电极表面,保持电极具较好的电子转移活性,以此制备了一个新型的电化学传感器。用XRD表征了Au-Ni材料。以循环伏安法,交流阻抗法,计时电流等电化学方法研究了此传感器的电化学特性,研制的电极对葡萄糖检测的线性范围为2.5×10-5-9.5×10-4 mol/L,相关系数R为0.9950,检测限为1×10-5 mol/L。该传感器具有响应快,灵敏度高和稳定性好等优点。常见的尿酸和抗坏血酸对葡萄糖检测不干扰。(2)通过壳聚糖的粘合作用,把镍金材料修饰于玻碳电极表面形成复合膜,再将酪氨酸酶(Tyr)借助NHS-EDC修饰于复合膜上,制备了一种新型的酪氨酸酶修饰电极。以循环伏安法和电化学阻抗谱实验研究了修饰电极的电化学性能。由于复合材料良好生物相容性和电导率, NHS-EDC联酶法保持了酶活性和稳定性,该传感器对双酚A具有良好的电化学响应。在最佳实验条件下,该传感器对双酚A的检测范围为:4.0×10-8-5.0×10-6 mol/L,检测限为1.0×10-8(信噪比=3),线性相关系数为0.9944。该传感器具有良好的性能,重现性,稳定性和抗干扰能力。(3)将酪氨酸酶,金纳米粒子和纳米二氧化钛(TiO2)纳米复合膜固定于玻碳电极上制备出一种酪氨酸酶传感器,对其电化学性能进行研究。TiO2的特殊结构可以有效地防止金纳米粒子AuNPs团聚,提高金纳米离子促进电子的转移的能力,在此复合膜内Tyr保持了较高的生物活性。循环伏安扫描表明TiO2和AuNPs的组合具有协同效应,不仅提高了电子的转移,还提高了此修饰电极的电化学性能,使得复合膜内的Tyr发挥对BPA良好的催化还原性质。实验结果表明:BPA浓度在2×10-72.8×10-6mol L-1与响应电流成良好的线性关系,线性相关系数R=0.9967(n=14),检测限为5×10-8 mol L-1(信噪比S/N=3),该电极的=0.48mmol L-1。