基于Kisspeptin--GPR54-GnRH信号通路探讨玉米赤霉烯酮诱导儿童中枢性性早熟的分子机制

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目的:探讨Kisspeptin-GPR54-GnRH信号通路在玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)诱导的雌性大鼠中枢性性早熟(central precocious puberty,CPP)中的作用机制,探究玉米赤霉烯酮与儿童性早熟发生发展的相关性以及Kisspeptin-GPR54-GnRH信号通路在这一过程中的调节作用。方法:选择雌性SD大鼠30只,随机分为正常青春前期组(A组)、青春期组(B组)和ZEA组(C组),每组各10只。ZEA组每日灌胃400mg/kg玉米赤霉烯酮以建立CPP模型。观察各组阴道开放时间及性周期、测量子宫指数、卵巢指数、卵巢黄体出现率和子宫壁厚度;Real-Time-PCR法检测下丘脑中的KISS-1mRNA、GPR54mRNA和促性腺激素释放激素(GnRH) mRNA表达量;Western blot检测下丘脑中Kisspeptin、GPR54和GnRH蛋白表达水平。以20名6~8周岁TannerⅠ期健康女童作为健康对照组,经生长发育评估结果选取20名6~8周岁处于TannerⅡ期的CPP女童作为实验1组,20名6~8周岁处于Tanner Ⅲ期的CPP女童作为实验2组。用高效液相色谱法测定血清中ZEA及其衍生物的含量并分析ZEA及其衍生物与CPP发生发展的相关性;Western blot检测外周血血清中Kisspeptin、GPR54和GnRH蛋白表达水平并作相关性分析。结果:ZEA组大鼠性发育起始时间早于对照组(A组和B组),且各检测指标明显高于正常青春前期组(P<0.05),但正常发育的青春期组与ZEA组比较无统计学差异;随着青春期发育,青春期组和ZEA组大鼠下丘脑中KISS-1、GPR54和GnRH在转录水平和翻译水平的表达量均逐渐升高。CPP女童血清中ZEA及其衍生物含量明显高于健康对照组女童(P<0.05),且实验2组略高于实验1组,但无统计学差异;提前进入青春期的CPP女童外周血血清中Kisspeptin、GPR54和GnRH的蛋白表达量明显高于健康对照组女童(P<0.05)。结论:利用ZEA可诱导建立理想的雌性大鼠CPP模型,随着大鼠青春期的发育,下丘脑中KISS-1、GPR54和GnRH在转录和翻译水平的表达逐渐升高,表明Kisspeptin-GPR54-GnRH信号通路在CPP的发生和发展过程中起着重要作用;环境内分泌干扰物ZEA及其衍生物能够导致女童发生CPP病变,且在这一过程中Kisspeptin-GPR54-GnRH信号通路起到至关重要的作用。
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