五味子醇提液干预阿霉素诱导的足细胞损伤的体外研究

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目的:观察五味子醇提液(schisandra chinensis fruit ethanol extract,SE)对阿霉素(adriamycin,ADR)诱导的体外足细胞损伤中足细胞裂孔膜蛋白nephrin和骨架蛋白desmin表达的影响,并探讨其保护作用机制。方法:体外阿霉素作用于足细胞24h,造成足细胞明显损伤后,加入含SE的培养基,继培养24h。设对照组(培养基含0mg/L ADR)、模型组(培养基含0.25mg/L ADR)、SE干预组(培养基含250mg/L SE+0.25mg/L ADR)、SE组(培养基含250mg/L SE)。MTT比色法检测各组细胞活力;免疫荧光法测定各组nephrin及desmin的表达;、Western Blot检测各组nephrin和desmin蛋白表达;RT-PCR检测各组nephrin和desmin mRNA表达。结果:MTT比色法结果显示模型组细胞活力明显降低,SE干预组细胞活力较模型组增加,均有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光结果显示对照组和SE组nephrin呈颗粒状或线性分布于细胞膜,模型组较对照组、SE组和SE干预组表达强度明显减少;对照组与SE组足细胞desmin几乎不表达或少量表达,模型组则表达量明显增强,以颗粒状分布于细胞核,SE干预组较模型组表达量减少。模型组nephrin蛋白和mRNA表达较对照组显著减少,SE干预组nephrin蛋白和RNA表达水平较模型组增加,模型组desmin蛋白和mRNA表达较对照组显著增加,SE干预组desmin蛋白和mRNA表达水平较模型组显著减少(均P<0.05)。结论:浓度为0.25mg/L的ADR体外作用于足细胞24h,可以诱导足细胞明显损伤;足细胞损伤后其损伤标志性分子nephrin表达显著减少,desmin表达显著增加;浓度为250mg/L的SE体外单独孵育足细胞对其无损伤作用;SE能显著上调足细胞裂孔膜蛋白nephrin,下调骨架蛋白desmin蛋白及mRNA表达;SE对损伤后的足细胞有保护作用,通过上调足细胞裂孔膜蛋白nephrin和下调骨架蛋白desmin的表达从而保护足细胞的结构和功能的完整性而发挥作用。
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