假地枫皮的化学成分和冬凌草内生真菌次级代谢产物及抗肿瘤活性研究

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背景:本论文是由两个课题组成,第一个课题是假地枫皮的化学成分研究,第二个课题是冬凌草内生真菌次级代谢产物和抗肿瘤的初步探究。第一部分为2012年度国家自然科学基金面上项目“八角属化学成分及抗乙型肝炎病毒(HBV)活性研究(编号:81172961)课题研究内容。假地枫皮是八角科(Illiciaceae)八角属(Illicium)植物假地枫皮(Illicium jiadifengpi B.N.Chang)的干燥根皮和茎皮。主要分布在安徽南部、湖北东南部、和广西等地,是我国所特有的植物。收载于《浙江植物志》、《浙江民间常用草药》,其根皮和茎皮具有治疗祛风散痛和跌打损伤的功效,有小毒,常作为地枫皮的伪品。直到1982年报道确定假地枫皮是八角属植物的一个新种。综合文献报道和前期预实验发现该含有丰富的倍半萜内酯类化合物的假地枫皮中的倍半萜内酯类的化合物具有抗乙型肝炎病毒(HBV)的活性,八角属植物假地枫皮中含有丰富的倍半萜内酯类的化合物,因此,我们选择以假地枫皮为研究对象,试图从假地枫皮中分离得到具有抗 HBV活性的化学成分。第二部分:冬凌草(Rabdosia rubescens)是唇形科(Labiatae)香茶菜属(Rabdosia)碎米桠的变种。喜阴,具有很强的抗寒性,属于阳性耐阴植物,具有消炎止痛、清热解表以及抗肿瘤活性等功效。植物的代谢产物多种多样,是抗菌、抗肿瘤等天然活性物质的重要来源,本部分以冬凌草为研究对象,试图从冬凌草的内生真菌代谢产物中寻找到具有抗肿瘤活性的有效成分。  目的意义:一、国内外的学者虽然对八角属植物进行了化学成分和生物活性的研究,但是文献中关于假地枫皮的化学成分研究报道较少,缺乏系统性和深入的化学成分和药理方面研究。本文通过研究假地枫皮的果实,以期能够明确假地枫皮的化学成分及活性部位。这对假地枫皮的植物资源的保护与开发应用具有一定的意义。二、植物体内的内生真菌种类繁多,分布广泛。近年来,从植物的内生真菌次级代谢产物中分到了结构新颖并且具有独特生理活性的化合物,论文以冬凌草内生真菌为研究对象,试图从冬凌草内生真菌的次级代谢产物中分离与原生植物中相似或不同的化合物,筛选出到具有抗肿瘤活性的化合物。  方法:(1),通过采用正相硅胶柱,MCI柱,大孔吸附树脂柱,SephadexLH-20,聚酰胺柱,制备液相等色谱分析法进行分离纯化,利用现代波谱技术(IR,UV,MS,13C-NMR,1H-NMR,2D-NMR)及其他相关技术进行分析和鉴定。(2)冬凌草内生真菌部分,以河南省济源太行山的新鲜的冬凌草的根、茎和叶为研究对象,通过运用组织分离法,得到了18株冬凌草内生真菌。采用 MTT法,对分到的内生真菌代谢产物和单体化合物Altaertoxin-?进行抗肿瘤活性研究。  结论:(1)从假地枫皮中分离鉴定出了16个化合物,其中7个化合物为首次从假地枫皮中分离鉴定出来,分别为Icariside E4,1S-miwaneone,1R-miwaneone,6-deoxy-hydroxyneoanisatin,(1β,4β,6α)-gorgonane-1,4,11-triol,(1S,2S,4S,6R)-4-Isopropenyl-1-methyl-7-oxabicyclo-[4,1,0]-heptan-2-ol。分离鉴定的化合物中9个倍半萜类,1个单萜类,1个木脂素类,以及5个其他类成分。实验研究表明假地枫皮果实所含化学成分的特点是含有大量的倍半萜内酯类成分。(2)从冬凌草中分离得到了18株内生真菌,其中内生真菌的优势种群是链格孢属,占总数的50%。单体化合物Altertoxin-?具有抗胃癌活性,其IC50为0.28μmol/ml。
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