基于量子点标记仿生免疫分析检测有机磷农药的方法研究

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农药作为一种化学制剂,被广泛应用于调节植物生长和防治农林牧业生产中的有害生物,但农药残留造成的土壤、水体的污染及对人体产生的危害也不容忽视。有机磷农药种类繁多且田间复配现象普遍,因此需要建立一个快速简便的农药多残留检测方法。传统的检测方法虽然灵敏度和精确度高,但材料消耗大,仪器昂贵,对操作人员要求高等缺点限制了其应用,而免疫分析方法具有灵敏、简便、快速的优点。同时量子点尺寸小且具有独特的光学性能和标记性能,其一元激发多源发射的特点为多残留检测提供可能。本实验结合量子点标记技术和分子印迹技术,建立了果蔬中有机磷农药多残留快速检测方法。主要研究结果如下:1.基于量子点标记仿生分析免疫检测敌百虫的方法。以敌百虫为模板分子,通过本体聚合法,直接在96孔酶标板表面合成亲水性水相分子印迹膜作为仿生抗体,通过直接竞争反应,建立仿生免疫(BIA)分析方法。实验表明,在最佳条件下,该BIA方法的最低检出限(LOD,IC15)和灵敏度(IC50)分别为9.0μg L-1和5.0 mg L-1。本方法对三个浓度水平的菠菜和油菜样品敌百虫添加回收率为83.3%-90.2%,该方法还应用于黄瓜、韭菜实际样中敌百虫的定量检测,与气相色谱结果对比,无显著差异。2.基于量子点标记仿生免疫农药多残留检测方法的研究。以敌百虫和毒死蜱为模板分子,甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)为交联剂,通过本体聚合方法,直接在96孔酶标板上合成复合分子印迹膜作为仿生抗体,用不同量子点分别标记敌百虫和毒死蜱半抗原作为抗原,建立仿生免疫分析方法。在最优条件下,该方法对敌百虫的最低检测线(LOD,IC15)和灵敏度(IC50)分别为19.0μg L-1和9.0 mg L-1,对毒死蜱的最低检测线(LOD,IC15)和灵敏度(IC50)分别为18.0μg L-1和11.0 mg L-1。本方法对橙子和胡萝卜的添加回收率为77.8%-92.0%。对苹果和香蕉实际样进行检测,与气相色谱所得结果有较好的一致性。
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