苦参碱对宫颈癌SiHa细胞增殖的抑制作用及其对JAK-STAT通路的影响

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目的观察中药苦参碱(Matrine)对宫颈癌SiHa细胞增殖的抑制作用以及对JAK-STAT (Janus Kinase/Signal Transducers and Actiators of Transcription)信号转导通路的影响。方法1体外培养宫颈癌SiHa细胞,观察细胞的生长状态,取处于对数生长期的细胞用于试验。2试验分组:(1)实验组:用不同浓度的苦参碱处理宫颈癌SiHa细胞,使其终浓度分别为0.25mg/ml、0.5mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml、4.0mg/ml;(2)对照组:只加入细胞悬液,未经药物处理;(3)空白对照组:不接种细胞,仅加入细胞培养液。3应用MTT法检测不同浓度苦参碱(0.25mg/ml、0.5mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml、4.0mg/ml)作用于宫颈癌SiHa细胞24h、48h及72h后细胞的增殖情况。4采用蛋白印迹法(Western blotting)法检测不同浓度苦参碱(0.5mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml)作用于宫颈癌SiHa细胞48h后,SiHa细胞中JAK1、JAK2、STAT3蛋白的表达水平。结果1苦参碱能够抑制体外培养的宫颈癌SiHa细胞的增殖,该抑制作用呈时间-剂量依赖性。各组不同作用时间比较,苦参碱对宫颈癌SiHa细胞增殖的抑制率差异显著(P<0.05、0.01)。当苦参碱的加入浓度在0.25mg/ml~4.0mg/ml的范围时,苦参碱的浓度越高,其对宫颈癌SiHa细胞的增殖抑制效应越明显;2不同浓度的苦参碱(0.5mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml)作用于宫颈癌SiHa细胞48h后,各实验组中JAK1、JAK2和STAT3蛋白的表达水平降低(P<0.01),且有剂量依赖性。结论苦参碱对宫颈癌SiHa细胞有抑制作用。其作用机制可能是通过降低宫颈癌细胞中JAK-STAT信号转导通路的活性,从而抑制宫颈癌细胞的增殖,有望成为治疗宫颈癌以及抑制其侵袭转移的一种新的策略。
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