环境雌激素17β-E2对栉孔扇贝内分泌干扰的作用机制

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:lxlhenhao
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环境内分泌干扰物(Endocrine disrupting chemicals, EDCs)是指能够影响生物体正常内分泌行为的外源性化学物质。这些物质通过影响生物体体内激素的合成、贮存、分泌和转运,使内分泌系统失调,进而阻碍或干扰繁殖、生长发育等正常生物功能。目前,有关EDCs影响或干扰生物内分泌的研究主要集中在脊椎动物。无脊椎动物占动物种类数的95%以上,其研究主要是集中在有机锡污染导致螺类雄性化方面,而关于环境雌激素对无脊椎动物内分泌影响的研究则相对缺乏。近年,各国相继发现沿海双壳类生物性腺组织发生性畸变(雄性雌性化),这对无脊椎动物的繁殖、种群稳定和生态功能产生了潜在的危害。因此,揭示双壳类发生性畸变的毒理机制是一个重要的环境科学问题,对加强环境EDCs的风险管理具有重要意义。本研究以我国沿海广泛分布并具有重要经济价值的栉孔扇贝(Chlamys farreri)为研究对象,首先利用LC-MS/MS分析了栉孔扇贝繁殖周期的内源激素水平变化,发现随着性腺发育精巢组织中睾酮(testosterone,T)由低到高达到一个峰值后降低,而雌二醇(17β-estradiol, E2)的浓度水平随着性腺发育逐渐升高,但在成熟期之前急剧下降,并没有表现出和性腺发育相同的趋势;而雌酮(estrone,E1)浓度水平明显低于E2和T,并且在整个繁殖周期没有发生明显变化;卵巢组织中E2水平明显高于精巢,并在成熟期达到最高值,排卵后迅速下降,并与性腺发育周期变化相一致。而T的浓度水平呈现两个峰值。另外,E1的浓度水平较精巢略高。这些结果表明内源性激素与配子发育具有相关性。在此基础上,对繁殖相关基因:Vtg、ER、CaM-1和CaM-2mRNA的表达水平进行定量,发现Vtg和CaMs mRNA表达水平随性腺发育呈上升趋势,而ER mRNA表达水平则始终保持较低水平,说明雌激素的作用并不是通过ER受体途径,而是可能存在其它的作用途径。为了进一步探讨雌激素的作用机制,我们利用二代高通量测序技术(454)测定了暴露于E2条件下栉孔扇贝性腺的转录组,共得到了51997个Unigene,平均读长达626bp。差异基因表达的分析结果表明:60个Unigene在对照组与暴露组样品中具有明显的差异表达,并有32个unigenes(性腺)随着暴露浓度增加表达量增加。同时,此次数据库中也发现了大量有关分子功能、细胞组分以及生物学过程如生长,发育,繁殖和信号转导的基因,这为探索外源雌激素对软体动物的作用机制奠定了分子生物学基础。
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