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阳明腑实证(Yangming fu-organ disease, YMFOD)是临床常见的一组胃肠运动障碍性疾病,突出表现为“痞、满、燥、实”等主要特点。近来报道,Cajal间质细胞(Interstitial cells of Cajal,ICC)在胃肠道平滑肌细胞的节律性收缩及由之承载的胃肠运动中扮演着重要角色,而后者对胃肠消化吸收意义不容小觑。目的:本实验旨在通过检测阳明腑实证大鼠和经大承气汤(Da-Cheng-QiDecoction, DCQD)治疗后大鼠小肠ICC的凋亡情况,进一步明晰大承气汤的治疗作用。并藉此探讨阳明腑实证大鼠小肠ICC凋亡途径及大承气汤的干预机理。方法:选用体重180-220克健康成年Wistar大鼠100只,随机分为对照组(Control group)(20只)、阳明腑实证组(YMFOD group)(40只)、大承气汤治疗组(DCQD group)(40只)。YMFOD组大鼠连续灌服主要成分为附子、肉桂、干姜的热性中药水煎剂12天。于第13,14天灌以自身粪便混悬液,第15天腹腔注射细菌内毒素,建立阳明腑实证动物模型。对照组以等量生理盐水代替灌胃和腹腔注射。DCQD组大鼠自成功建立模型起,给予大承气汤连续灌胃5天。第20天时取存活大鼠上段小肠用于研究。应用组织化学染色与脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(Terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated dUTPnick end labeling,TUNEL)技术检测ICC凋亡情况。用透射电镜观察ICC形态变化。结果:与对照组大鼠相比,YMFOD组大鼠肠管明显水肿,肠系膜可见大量出血点。而DCQD组肠管水肿与系膜出血均明显减轻。光镜下见对照组小肠黏膜层整齐,细胞结构清晰。黏膜下层腺体规则。平滑肌层均匀分布,可见较多细胞核。相比之下YMFOD组表现为小肠绒毛变少,残存绒毛扁平。黏膜上皮变薄,细胞间连接疏松。平滑肌层次菲薄。各层均见较多炎细胞浸润。DCQD组明显好于YMFOD组,介于YMFOD组与对照组二者之间。仅有少量淋巴细胞浸润。TUNEL法检测细胞凋亡对照组小肠肌层未见明显凋亡的ICC。YMFOD组小肠肌层内ICC网络结构完整性受损。可计数到较多凋亡的ICC。DCQD组则明显改观,小肠肌层ICC相互靠近连接成网。但仍有一定数量凋亡的ICC。透射电镜观察对照组ICC细胞核大细胞质少,染色质轮辐状分布在卵圆形的细胞核周边。胞质富含光面内质网、线粒体和成熟的高尔基体。粗肌丝则相对较少,中间丝多在核周和细胞突起处集中分布。ICC之间及其与平滑肌细胞(smoothmuscle cell,SMC)之间存在大量缝隙连接(gap junction,GJ);其突起与神经纤维关系密切,间距较小。YMFOD组ICC虽然细胞膜完整,但细胞整体形态无规则,细胞膜周围小凹减少。ICC之间及其与SMC之间的GJ减少,与周围细胞关系疏远。细胞质电子密度不均。线粒体水肿严重,常见崩溃及破裂碎片。光面与粗面内质网均明显减少。高尔基体数量下降。中间丝模糊。明显可见核纤层增宽,染色质边集异常,核内电子密度分布不均。DCQD组可见ICC线粒体水肿不明显,内外膜均较完整。光面内质网丰富,高尔基体数量增多。中间丝清晰,且含量丰富。核纤层无明显改变,染色质边集典型。结论:阳明腑实证大鼠小肠肌层Kit表达明显减弱,ICC明显减少,凋亡增加,ICC形态结构与功能受损严重;大承气汤可通过减少凋亡修复ICC损伤并恢复其功能;进而改善胃肠运动功能有效治疗阳明腑实证。