【摘 要】
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目的:探讨抑制c-FLIP的表达对TRAIL诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响。方法:1.将MCF-7乳腺癌细胞系进行复苏、传代、培养。2.用重组腺病毒Ad-c-FLIP-siRNA和Ad-sTRAIL单独及联
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目的:探讨抑制c-FLIP的表达对TRAIL诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响。方法:1.将MCF-7乳腺癌细胞系进行复苏、传代、培养。2.用重组腺病毒Ad-c-FLIP-siRNA和Ad-sTRAIL单独及联合感染对TRAIL耐药的乳腺癌细胞MCF-7。3.应用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测病毒感染后各组细胞内c-FLIP和TRAIL的mRNA表达变化。4.应用MTT法和结晶紫染色法检测MCF-7细胞活性,Hoechst33258荧光染色检测各组细胞的凋亡情况。结果:1.与阴性对照组比较,c-FLIP-siRNA 组和 c-FLIP-siRNA+TRAIL 组 c-FLIP 的mRNA相对表达量分别是(0.32±0.16)和(0.39±0.48)倍;TRAIL组和c-FLIP-siRNA+TRAIL 组 TRAIL 的 mRNA 相对表达量分别是(96.21 ± 1.54)和(87.33±1.66)倍。2.TRAIL 组、c-FLIP-siRNA 组及 c-FLIP-siRNA+TRAIL 组的抑制率(%)分别为(60.27±1.25)、(11.34+1.74)及(74.91±2.12)。3.对比阴性对照组的凋亡率(3.12 ± 1.54),TRAIL组(12.79±2.46)和c-FLIP-siRNA+TRAIL 组(25.50±3.17)组的凋亡率明显增高(p<0.05),c-FLIP-siRNA组(6.85±2.82)的凋亡率变化不明显,差异无统计学意义(p>0.05)。结论:siRNA抑制c-FLIP基因的表达能显著促进TRAIL对乳腺癌细胞MCF-7凋亡的诱导作用。
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