多肽SlIDAs在番茄花柄脱落中的作用研究

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番茄(Solanum lycopersicum)是重要的经济效益蔬菜作物之一,落花落果影响其经济效益。IDA编码一个小肽,该肽通过富含亮氨酸的重复受体样激酶HAESA发出信号(HAE)和HAE-LIKE2(HSL2)来控制花器官的脱落,研究发现在拟南芥中IDA–HAE–HSL2途径可能独立于乙烯模式控制脱落,而在番茄中IDA–HAE–HSL2是如何调控脱落尚不明确。因此本文利用生物学分析筛选出调控脱落的IDA1、IDA7、IDA8,对其进行研究。试图揭示IDA基因在番茄花柄中的调控作用,与乙烯相关的调控途径及机制。研究其脱落机制对果实发育调控以及生产中的栽培管理具有一定的指导意义。主要研究结果如下:1.利用全基因扫描挖掘了番茄IDA11个的家族成员,结果显示在番茄IDA1、IDA7、IDA8在番茄花柄脱落过程中呈特异性表达。利用体外合成多肽处理番茄花柄,试验分析:当SlIDA1,SlIDA7和SlIDA8多肽浓度0.1μM时没有诱导脱落的效果,在1μM时可以促进花柄脱落,当浓度在10μM时,极显著促进了花柄脱落,而100μM诱导脱落效果与10μM无差异。2.利用CRISPR/Cas9技术构建了SlIDA1,SlIDA7和SlIDA8基因敲除植株并对其脱落率进行测定,试验发现CR-slida1,CR-slida7和CR-slida8延缓脱落发生。3.乙烯处理可以促进CR-slida1,CR-slida7和CR-slida8花柄的脱落进程,但其促进效果较对照较小。施加SlIDA1,SlIDA7和SlIDA8多肽可以显著加速1-MCP说明IDA作用于乙烯的下游调控脱落发生。4.对敲除植株进行了纤维素酶和果胶酶表达量进行测定,试验结果显示,敲除植株CR-slida1、CR-slida7和CR-slida8中纤维素酶和果胶酶表达均不同程度下调。
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