德氏乳杆菌保加利亚亚种双组分信号转导蛋白HPK1和RR1的功能分析

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dengliguo1971
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德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus)以其优良的发酵特性,在世界上广泛应用于各种发酵乳的生产,是一种具有很高经济价值的乳酸菌。尽管研究者对其进行了大量研究,但主要集中在发酵性能和应用方面的研究,而对该菌的代谢机制等方面研究甚少。双组分信号系统是细菌中一种重要的调控机制,参与调控pH变化、趋化性、孢子形成、细胞分裂、生物膜形成等多种生理生化过程以适应环境的变化。该系统由组氨酸蛋白激酶和应答调节蛋白两部分组成。近年来,研究者发现某些乳酸菌中存在着一些双组分信号系统,参与乳酸菌的耐酸性、粘附和定殖能力、细菌素合成等生理功能的调控。本论文以德氏乳杆菌保加利亚亚种CH3为实验材料,对该菌的双组分系统HPK1/RR1进行功能分析,旨在揭示其在耐酸和粘附调节中的作用。本研究通过构建自杀性载体pUC18-rr1-EM-1和pUC18-hpk1-EM-1,分别转化到野生型菌株中,筛选获得了hpk1和rr1的突变体CH3-H1和CH3-R1,并构建了相应的互补菌株CH3-H1C和CH3-R1C。对上述菌株与野生型菌株,进行生长速度、细菌形态、耐酸能力、生物膜形成能力的比较分析。结果发现,突变体生长速度明显低于野生型菌株;同时突变体耐酸能力下降,并且生物膜形成能力也降低。以上结果表明,HPK1/RR1是一个多效调控系统,可参与细菌耐酸能力、粘附能力和生长能力的调节。
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