绵羊毛性状相关基因在皮肤中差异表达的研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xyjslzy
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该论文实验通过运用现代生物技术-mRNA差异显示技术来探讨在绵羊皮肤中调控羊毛性状的相关基因的差异表达,运用mRNA差异显示技术对同一个体的绵羊的不同部位(肩部、腹部、腿部)和不同生长阶段(40、60、120日龄)皮肤中的总RNA进行了差异显示研究,分别从以上绵羊皮肤中提取总RNA,利用P.Laing设计差异显示的第三代引物(锚定引物和随机引物),采用锚定引物将mRNA反转录成cDNA第一链,利用随机引物进行PCR扩增,然后用10%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异片段,利用银染技术显示差异片段,从凝胶上回收差异片段,并将其纯化、再扩增.该实验结果表明:在同一个体绵羊的肩部、腹部、腿部皮肤中存在着差异表达的基因,并初步筛选出了8条重复性好的差异cDNA片段,其中5条差异片段为肩部特有,3条为腹部特有.而在同一个体不同日龄的绵羊皮肤中存在着表达量不同的差异表达基因,并初步筛选出了8条重复性好的差异cDNA片段,其中2条表达量不同的差异片段存在于40日龄,5条存在于60日龄,1条为120日龄所特有.由此可见,虽然不同部位和不同生长阶段的绵羊皮肤中的基因大多数是相同的,但也存在差异表达的基因,特别是在不同部位的皮肤中基因的差异更为明显,而在不同阶段的皮肤中虽然也存在基因表达的差异,但只是存在同一基因表达量的差异.这些不同的差异基因可能就是影响和调控绵羊毛性状的相关基因.该试验的研究结果将为进一步研究影响绵羊毛性状相关基因在皮肤中的差异表达提供科学的参考依据.为今后进一步开展绵羊的分子育种和最终揭示调控毛性状的分子机理打下坚实的理论基础.
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