黄芪注射液联合胰岛素对糖尿病大鼠氧化应激水平的影响

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糖尿病是一种慢性进行性疾病,目前糖尿病的发病率呈上升趋势,持续的高血糖攻击全身的微血管和大血管,是导致成年人失明、视力损害、非损伤性截肢和肾衰竭的主要原因。DN是终末期肾脏功能减退的主要原因,而目前并没有有效的药物能够预防和阻止糖尿病肾病的发生。目前糖尿病肾病的发病机制尚未完全阐明,是多因素、多机制共同作用的结果,而高糖介导的氧化应激被认为是重要的共同的机制之一[3]。所谓氧化应激(OS)就是指活性氧簇(ROS)或活性氮簇产生增多和或/清除减少,导致ROS在体内蓄积而引起的分子、细胞和机体的损伤。ROS是超氧阴离子(O2-)、羟自由基(OH-)和过氧化氢(H2O2)等活性含氧化合物的总称[25]。氧化应激产生的活性自由基可直接攻击细胞膜表面的不饱和脂肪酸,产生脂质过氧化产物丙二醛,使肾脏组织细胞膜的生理结构遭到破坏。高糖影响下,组织内的抗氧化剂如:SOD、GSH-px等发生糖化及氧化,肾组织清除自由基的能力大大减弱。DM早期由于机体代谢紊乱以及高糖状态促进炎症性因子IL-6的产生增加,而高血糖可直接导致肾小球系膜细胞损伤并释放IL-6,导致恶性循环。相关研究也得出IL-6水平与DM的高糖状态有相关性,且与DM的炎症状况呈正相关[18],另外高糖状态下,肾组织糖代谢紊乱细胞外蛋白非酶糖化产生大量的晚期糖基化终末产物(AGEs),AGEs与其受体相互作用,产生大量的ROS,ROS通过激活细胞内的PKC通路使转录因子NF-κB等活化,启动多种细胞因子释放,这些细胞及炎症因子组成复杂的反应系统,促进肾组织细胞增大,组织细胞合成胶原蛋白增加,最终导致肾小球的硬化,启动糖尿病肾病的发生及发展[19,20,21]。因此,弄清氧化应激引发糖尿病肾病机制,寻找抗氧化剂及阻断氧化应激的药物,是有效预防糖尿病肾病发生的关键。黄芪有抗氧化作用,能够减轻自由基代谢紊乱;黄芪具有抑制氧化糖基化的作用,能够延缓肾小球的硬化,保护肾脏功能[22]。一项实验研究结果表明,黄芪能显著抑制脑缺血再灌注大鼠脑组织MDA产生并提高SOD活性,从而清除氧自由基,并从超微结构上证实,其对膜性结构亦有一定保护作用[23]。且黄芪毒性小,不易产生耐药,具有广泛的应用前景。本研究主要是通过黄芪抗氧化清除自由基的能力,及时清除由于血糖波动而导致的自由基产生,研究黄芪对应用胰岛素治疗的糖尿病大鼠是否有降低氧化应激水平及保护肾脏免受氧化应激损伤的作用。本实验首先将链脲酶菌素(STZ)处理的糖尿病大鼠模型随机分为正常组、模型组、黄芪组、胰岛素组和黄芪联合胰岛素组五组,给予黄芪灌胃和或/胰岛素皮下注射、或不接受治疗。记录糖尿病大鼠血糖及体重变化,测定糖尿病大鼠血肌酐水平、检测肾脏组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性、白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF-α)含量。丙二醛(MDA)是组织脂质过氧化产物的终产物之一,其含量可反映组织细胞的脂质过氧化程度,采用TBA显色法测定MDA含量,结果显示:与胰岛素组相比,黄芪联合胰岛素组MDA值显著降低,肾脏组织中非酶类抗氧化物酶SOD和GSH-px活性均显著升高。白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF-α)是重要的免疫调节因子及炎症性因子,参与机体的炎症反应。已有研究表明血清IL-6及TNF-a的含量可作为糖尿病病情发生、发展和转归的检测指标[24]。结果显示:和胰岛素组相比,黄芪联合胰岛素组IL-6、TNF-α值均显著降低。综合本研究结果显示:黄芪对应用胰岛素治疗的糖尿病大鼠有降低氧化应激水平及保护肾脏免受氧化应激损伤的辅助作用。
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