中间丝结蛋白和波形蛋白在大鼠急性缺血再灌注心肌的变化特征及前胡甲素对其影响

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前言 细胞骨架(cytoskeleton)是维持细胞形态、结构完整以及正常功能的重要结构和物质基础,包括3种蛋白细丝,即:微丝(microfilament,直径5~8nm)、中间丝(intermediate filament,直径10~12nm)和微管(microtubule,直径约25nm),而中间丝的改变与人类某些疾病直接相关。目前主要有6种中间丝蛋白,即:角蛋白、波形蛋白(vimentin,Vim)、结蛋白(desmin,Des)、胶质纤维酸性蛋白、神经微丝和巢蛋白等。在心肌组织中,主要为Des和Vim。最近的研究表明,心肌Des结构排列紊乱会影响肌小节的移动,导致心肌收缩力下降。因此,对这两种中间丝变化规律和作用机理的探讨,有助于帮助我们理解某些心血管疾病的发生发展过程以及探寻新的临床药物和治疗靶位。 心脏再灌注损伤表现为再灌注心律失常、心肌顿抑、结构损害和心肌内出血等,其机制主要是氧自由基和细胞内钙超负荷两个因素。最近研究表明,再灌注早期胞浆Ca2+很高的情况下,恢复肌丝收缩活动,就会导致心肌细胞过度收缩,造成骨架成分变形。当骨架成分变形超过正常收缩程度,即转为不可逆损伤。相邻细胞的过度收缩导致细胞间的相互破坏和细胞的坏死。心肌缺血期各种细胞骨架成分以不同方式,在不同程度上参与了缺氧/再氧合导致的胞浆肌酸激酶释放和细胞不可逆损伤过程,但对心肌Des和Vim的具体相关研究迄今尚未见报道。 我们前期工作已证明,从中药白花前胡中提取的有效成分前胡甲素(dl-Praeruptorin A,Pd-Ia)具有钙内流阻滞和钾通道开放作用,它通过抑制凋亡相关蛋白Fas等表达和降低IL-6水平等机制保护心肌免受再灌注损伤,故推测该药对缺血再灌注心肌中间丝Des和Vim亦应产生有益影响。本研究采用免疫组织化学和western blotting等技术和方法,首次对急性心
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