利用抗黄矮病小麦—中间偃麦草易位系HW642的细胞核DNA构建了1个可转化人工染色体(transformation-competent artificial chromosome，TAC)文库。文库由2.3×10~6克隆构成，重组率为90.48％，平均插入片段大小为22kb左右，约覆盖普通小麦单倍体基因组2.5倍，在该文库中分离得到单拷贝DNA序列的概率是95.77％。文库保存在24块96孔板中，每个孔中约含有1000个不同的重组克隆，采用Pooled PCR的方法对文库进行筛选。 对HW642一周龄幼苗接种饲黄矮病毒蚜虫，接种48h后取幼叶提取mRNA构建了一个cDNA文库，文库的滴度为1.5×10~6pfu/ml。随机挑取103个重组克隆，用限制内切酶EcoR Ⅰ、Xho Ⅰ消化，统计分析结果表明插入片段在150～4000bp之间，平均插入片段大小为2000bp左右，重组率为95.15％。 用来源于小麦7DL的简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)引物wms37扩增中间偃麦草、抗病易位系及感病材料，得到1条与抗性共分离的特异条带，约450bp。将此特异标记条带转化为SCAR(sequence characterized amplified region)标记，命名为SC-W37，用于筛选HW642基因组TAC文库，得到12个阳性克隆，对阳性克隆进行了PCR-Southern验证。分别以中间偃麦草、中国春基因组总DNA为探针与限制酶HindⅢ消化后的阳性克隆做反向Southern杂交，有2个克隆在杂交信号强弱上表现差异，但五种限制内切酶的RFLP分析结果没有找到中间偃麦草特异的多态性片段。 以SC-W37在中间偃麦草中的扩增产物作为探针筛选所构建的HW642 cDNA文库，得到2个阳性克隆。其中1个具有完整的开放读码框，长度为822bp，编码273个氨基酸。经NCBI分析同源性和EMBL分析结构特征，该蛋白序列与已发表的防卫反应基因抑制素(prohibitin)氨基酸序列有很高的同源性，与植物的抑制素序列的同源性为82.28％：与酵母的抑制素序列同源性为90.07％；与人和鼠的抑制素序列同源性为82.27％，并有其明显的结构特征。Southern杂交结果表明该基因为单拷贝序列，来源于小麦，可以作为小麦的抑制素候选基因，因此把它命名为w-ph。Northern杂交结果说明，该基因为低丰度组成型表达。根据w-ph两端序列设计引物扩增HW642、两个不同来源的中间偃麦草及感病亲本中8601基因组DNA，得到2～5条扩增带。以w-ph作为探针进行PCR-Southern杂交分析，在HW642中得到1条与阳性对照大小相同的杂交带，说明w-ph基因是缺少内含子的；而在中间偃麦草和中8601各有1条约1.8kb的杂交信号，说明在它们的基因组中也存在着Wph的同源序列。另1个阳性克隆长度为1050hp 为1不完整的核昔酸编码框，具有抗水解酶2归bhydrolase二）的同源序列，命名为 w心bh，在基因组中为中低拷贝序列，在BYDV和冷诱导后表现低丰度组成型表达。LA－PCR扩增产物的Southern杂交结果说明w－abh作为一个基因的一部分也是缺少内含子的。 利用抗病基因类似物探针STI筛选HW642 cDNA文库得到二个阳性克隆a－7和Stl22，核昔酸长度分别为1095hp 和122fop，编码281 和305个氨基酸，分别与植物螫合素合成酶和紫酸磷酸酯酶具有较高的同源性。