青霉素G酰化酶(Penicillin G acylase，简称PGA，EC3.5.1.11)广泛用于酶法制备β-内酰胺抗生素中间体6-氨基青霉烷酸(6-APA)和7-氨基-3-脱乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)。该酶还能催化合成多种以6-APA或7-ADCA为母核的半合成青霉素或头孢菌素。此外，青霉素G酰化酶亦应用于手性化合物的拆分和肽类合成中脱除保护基反应。青霉素G酰化酶有着巨大的工业应用价值，但游离酶对反应温度、pH、有机溶剂等的耐受性较差，且难以回收利用，因此国内外对青霉素G酰化酶的固定化进行了广泛的研究。　　 本文通过正硅酸乙酯的水解缩合，合成具有较大孔径的介孔材料MCFs，再在微波辐射下参照常规方法将青霉素G酰化酶固定在其表面及孔道中。以固定化酶相对活力和活力回收为指标，讨论了微波辐射功率、加酶量、温度、时间、pH等不同固定化条件对固定化酶的影响。本文考察对比了游离酶与固定化酶催化水解反应的最适pH值、最适温度、米氏常数、活性位点数以及固定化酶的热稳定性、连续操作稳定性和贮存稳定性。实验结果如下：　　 1.制备了粒径约为300～400nm的介孔材料MCFs，平均孔径26.06nm，比表面积为331.43m2/g，孔体积及孔径分布集中，比表面积大。　　 2.当微波功率为300W，加酶量为60mg/g，固定化温度为20℃，pH为8.0，时间为140s时，固定化湿酶活力为1191.3U/g，活力回收高达166.7％。与常规方法相比，微波辅助固定化活力回收提高30％以上，固定化时间由12h大幅缩短至140s。　　 3.与游离酶相比，青霉素G酰化酶经微波辐射固定化后，活性位点数及其对底物的表观亲和力有所提高，且两者均略高于常规方法制备的固定化青霉素G酰化酶。　　 4.游离酶和微波辐射固定化酶催化反应的最适pH值分别为8.5和8.0，最适温度分别为45℃和50℃。固定化酶适用的pH和温度范围比游离酶更加广泛。　　 5.微波辐射固定化酶具有良好的连续操作稳定性，连续反应10个批次，酶活仍保持在初始活力的70％以上；且比游离酶具有较好的热稳定性，固定化酶在50℃下保温2h，残余活力仍然保持在85％以上。微波辐射为青霉素G酰化酶的固定化提供了一条新的途径。