【摘 要】
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目的 研究槐定碱对肝癌细胞HepG-2的生长抑制及诱导凋亡作用,并探讨与其相关的Caspase-3、bcl-2、survivin基因调控的关系。 方法 采用MTT法、光镜、透射电镜、激光共聚焦
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目的 研究槐定碱对肝癌细胞HepG-2的生长抑制及诱导凋亡作用,并探讨与其相关的Caspase-3、bcl-2、survivin基因调控的关系。 方法 采用MTT法、光镜、透射电镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪和免疫组化技术研究槐定碱药物处理肝癌HepG-2细胞后,肝癌HepG-2细胞生长抑制、形态学变化、诱导凋亡和对Caspase-3、bcl-2、survivin基因表达的影响。 结果 MTT法证实槐定碱对肝癌HepG-2细胞生长具有明显的抑制作用,且浓度越高抑制率越强,有明显的量效依赖性关系(P<0.05)。 镜下可见细胞出现典型凋亡细胞形态学变化:细胞染色质浓缩、聚集于核边缘成块状、环状或新月状;细胞体积缩小、核固缩深染、细胞膜出泡、凋亡小体形成。流式细胞仪检测凋亡以1.6mg/ml槐定碱组作用最强,细胞周期阻滞于G0/G1期;且流式细胞仪检测空白对照组Caspase-3表达2.39%,1.6mg/ml槐定碱作用后Caspase-3表达45.6%。免疫组化技术检测槐定碱作用后bcl-2表达下调(36.0±3.3%降至22.7±4.2%);survivin表达亦下调(51.6±5.2%降至35.1±3.7%)。 结论 槐定碱可在一定浓度范围内诱导肝癌HepG-2细胞凋亡并有量效关系,揭示槐定碱的抗肿瘤活性是具确定性的,其机理可能与相关的Caspase-3、bcl-2、及survivin调控基因表达有关,为今后临床治疗肿瘤、联合用药及抗癌中药开发的研究提供了可靠依据,展现了广阔的前景。
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