【摘 要】
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小麦赤霉病(Fusarium head blight,FHB)是一种主要由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum,Fg)引起的全球性作物疾病,可造成小麦等粮食作物的大量减产。在侵染植物过程中,该菌会产生脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)作为效应因子协助其侵染。另外,DON也是污染粮食的主要真菌毒素。目前如何降解DON是国内外的研究热点,然而有关植物抗DON基因
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小麦赤霉病(Fusarium head blight,FHB)是一种主要由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum,Fg)引起的全球性作物疾病,可造成小麦等粮食作物的大量减产。在侵染植物过程中,该菌会产生脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)作为效应因子协助其侵染。另外,DON也是污染粮食的主要真菌毒素。目前如何降解DON是国内外的研究热点,然而有关植物抗DON基因的相关报道并不多,主要集中在一类编码葡萄糖基转移酶的基因。该类糖基转移酶可将DON的C3位的羟基糖基化,从而降低DON的毒性。为挖掘更多的抗DON基因,本研究通过筛选拟南芥EMS突变体库,获得了抗DON突变体,为阐明植物抗DON的分子机制奠定基础。首先,本研究对DON抑制拟南芥根生长的现象进行了详细的表型和细胞层面的分析,发现DON能使根尖的ROS水平大幅度升高和使根尖分生组织细胞数目减少。另外DON的施加会使生长素运输载体PIN1,PIN2和PIN3,以及信号通路的相关蛋白AUX1和DR5的表达显著减弱,说明DON影响了根尖细胞微环境,从而抑制了拟南芥根的生长。其次,本研究以根长为指标,筛选得到了四株抗DON突变体,并发现这些突变体均有一定的抗Fg侵染的能力。通过图位克隆与Mut Map结合的方法,将其中一株突变体dor1(DON-resistant 1)的突变位点定位于AT1G05680。该基因编码一个生长素IBA的葡萄糖基转移酶(UGT74E2),其第100位的甘氨酸因EMS诱变而转变成精氨酸。通过酵母异源表达实验发现该酶可以使DON的C3位的羟基糖基化,但进一步实验发现上述突变并没有显著地改变其对DON的糖基化能力,说明虽然UGT74E2具备DON糖基化能力,但上述突变并不是dor1抗DON的主要原因。通过分析幼苗发育阶段的表型,发现在正常培养条件下,dor1突变体植株略小,根长略短;而在施加生长素的条件下,dor1突变体的侧根密度增加幅度显著变小,这表明UGT74E2的突变影响了拟南芥对生长素的敏感性。综上所述,dor1中UGT74E2基因的突变使其对生长素的敏感程度下调,进而使拟南芥对DON和Fg有一定的抗性。因此,该突变体的鉴定为阐明DON影响生长素信号通路的分子机理和生长素在Fg侵染时的作用提供了一个非常好的遗传材料。
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