六月青石油醚萃取物对S180荷瘤小鼠抑瘤作用研究

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从中药寻找抗肿瘤有效成分具有广阔的前景。六月青在广西分布广泛。药理实验证实其具有抗病毒作用,一些初步的实验证实其有一定的抗肿瘤活性。但在现阶段,对六月青系统的抗肿瘤活性及机理研究几乎处于空白,本课题对六月青提取物进行抗肿瘤实验及相关研究,为六月青的进一步研究及开发利用提供科学依据。目的:研究六月青石油醚萃取物(petroleum ether extract of LYQ,LYQPE)对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法:①建立S180荷瘤小鼠腋下移植瘤模型:取小鼠50只,右腋皮下接种S180腹水肿瘤细胞0.2 ml,24 h后随机分为5组:模型组,阳性对照组(CTX),以LYQPE灌胃的高剂量、中剂量、低剂量药物组。每组10只小鼠,接种24 h后开始给药,给药10天。停药24 h后眼球采血、处死,摘取瘤组织称重,计算抑瘤率。②抗肿瘤免疫学:摘取S180荷瘤小鼠胸腺和脾脏,计算胸腺指数和脾脏指数;制备脾淋巴细胞悬液,用Con A刺激脾淋巴细胞增殖,MTT法检测脾淋巴细胞转化功能;制备腹腔巨噬细胞(MΦ)悬液,中性红法检测腹腔巨噬细胞吞噬功能;用ELISA法检测血清肿瘤细胞坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-2(IL-2)的含量。③抗氧化作用:用比色法测S180小鼠血浆丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。④瘤组织病理学改变:取瘤组织块,固定,HE染色观察瘤组织病理学改变及免疫组化法观察P53蛋白的表达。结果:①LYQPE能抑制S180荷瘤小鼠移植性肿瘤,与模型组比较有显著性差异(P<0.01或P<0.05),高剂量组、中剂量组抑瘤率高于30%。②LYQPE能增高胸腺指数,高剂量组与模型组比较显著差异(P<0.05),但对脾指数无明显作用(P>0.05);能促进脾淋巴细胞增殖,高剂量组、中剂量组与模型组比较有显著性差异(P<0.01);能增高MΦ吞噬功能,高剂量组、中剂量组与模型组比较有显著性差异(P<0.01 or P<0.05)。LYQPE增高血清TNF-α含量,高剂量组、中剂量组与模型组比较有显著性差异(P<0.01 orP<0.05);能增高IL-2的含量,高剂量组、中剂量组、低剂量组与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。③LYQPE能降低血浆MDA含量,升高SOD含量,高剂量、中剂量、低剂量组与模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。④HE染色可见LYQPE药物组瘤组织有病理学改变,高剂量、中剂量组瘤组织坏死严重。LYQPE能降低瘤组织中P53蛋白表达,高剂量、中剂量、低剂量组均有显著性差异(P<0.05)。结论:LYQPE对S180荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,其可能机制与改善小鼠免疫功能、清除自由基、增强机体抗氧化功能和诱导肿瘤细胞凋亡有关。
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