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目的建立LAMP法快速检测嗜麦芽窄食单胞菌L1、L2型β内酰胺酶的技术平台。通过研究嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株的分子分型,为其分子流行病学研究及临床抗感染治疗提供依据。方法利用DNA环介导恒温核酸扩增法(loop-mediated isothermal amplification ofDNA,LAMP)针对L1、L2型β内酰胺酶基因设计的5条特异引物,通过引物特异性识别β内酰胺酶基因上的6个独立区域来快速检测耐碳青霉烯类嗜麦芽窄食单胞菌。并通过实时浊度仪检测结果,在65℃恒温条件下50min即可完成LAMP反应;钙黄绿素的可视化检测结果也可区别绿色的阳性结果不同于橙色的阴性结果。通过对嗜麦芽窄食单胞菌的7对管家基因进行PCR扩增,并将测序结果与数据库进行比对,确定嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株的ST型,由此对18株嗜麦芽窄食单胞菌进行分子分型研究。结果建立起LAMP方法快速检测嗜麦芽窄食单胞菌L1、L2β-内酰胺酶的技术平台,LAMP检测法的灵敏度是PCR方法的100倍,且具有极好的特异性。PCR耗时长,步骤繁琐,且对样品的浓度要求更加严格,因此,LAMP法更适用于嗜麦芽窄食单胞菌L1,L2β内酰胺酶基因的快速检测。对18株嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株进行MLST分析的结果显示,18株耐药菌株中ST25型3株; ST4型4株; ST8型2株; ST31型5株; ST29型3株; ST28型2株;并且有两株ST23和ST24为新型分离株。结论LAMP方法易于操作、实验设施简便、反应结果肉眼即可辨别,并且具有灵敏度高、特异性强的特点,对非L1、L2β内酰胺酶基因的结果呈阴性反应,这表明了引物设计良好,特异性强,适用于临床和医院感染的L1、L2β内酰胺酶基因的快速检测。MLST是一种新型的研究嗜麦芽窄食单胞菌分子分型的方法,为该菌的流行病学研究提供了依据。