正畸牙移动中脂联素通过RANKL/OPG信号通路调节骨改建的实验研究

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目的探讨在正畸牙移动的过程中,外源性脂联素对成骨细胞/破骨细胞体系产生的影响,以及脂联素如何通过核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)信号通路影响正畸牙移动过程中牙槽骨的骨改建?分析脂联素对正畸牙移动速度和破骨细胞数量的作用及影响。方法45只SD成年大鼠双侧上颌建立正畸牙移动模型,随机分为3组,即:A组:注射外源性脂联素(15只)、B组:注射同等量PBS(15只)和C组:单纯正畸加力(15只)。从加力第1天起,在A组正畸牙颊侧牙龈黏膜下局部注射浓度4μg/ml脂联素0.5ml,B组注射等量PBS,C组单纯加力不注射。每2天注射一次。各组大鼠加力后分别于第1、3、7、10、14天处死,每个时间点3只。测量上颌第一磨牙近中牙移动距离,用HE染色观察被移动磨牙牙周组织形态学变化情况,应用TRAP染色计数压力侧牙槽骨中的破骨细胞数量,通过免疫组织化学染色法观察牙周组织中RANKL和OPG的表达和变化,应用图像分析系统对RANKL、OPG含量进行半定量分析。并采用SPSS16.0统计软件对实验结果进行分析。结果(1)牙移动距离:三组大鼠的牙齿移动距离均随实验时间的延长而逐渐增加。组间比较显示:除第1天和第3天外,其余时间点A组的牙移动距离均小于B、C组,差异均有统计学意义(P <0.05);而B、C两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)TRAP染色:三组压力侧破骨细胞数量均于第7d达到高峰。各时间点,B、C组破骨细胞数量均多于A组,但只在第7、10、14天有统计学意义(P<0.05)。而B组与C组比较,差异没有统计学意义(P>0.05)。(3)免疫组化染色结果:压力侧:A组相对于B、C组RANKL的表达及RANKL/OPG的比值减少,而OPG的表达量却增加,三者均先上升后下降,在第7天达到峰值。除在第1天和第3天外,其余时间点A组的RANKL表达及RANKL/OPG的比值均比B、C组小,而OPG表达比B、C组增高,差异均有统计学意义(P <0.05)。张力侧:A组OPG的表达比B、C组显著增加,从第7天开始,差异有统计学意义(P<0.05)。而A组RANKL的表达比B组、C组的表达略低,只在第7天有统计学意义(P<0.05)。A组RANKL/OPG的比值比B、C组小,在第7天、10天和14天差异有统计学意义(P <0.05)。B组与C组相比,各时间点的RANKL和OPG的表达及RANKL/OPG的比值,均无统计学意义(P>0.05)。结论脂联素通过抑制正畸牙移动中牙周组织RANKL的表达,促进OPG的表达,降低RANKL/OPG的比值,从而减少压力侧破骨细胞数量,牙移动速度逐渐减慢,提示脂联素有延缓正畸牙移动牙槽骨骨改建的作用。
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