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第一部分EGCG对多发性骨髓瘤细胞KM3增殖及蛋白酶体活性的抑制作用【目的】探讨绿茶茶多酚成分之一表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin -3-gallate (EGCG)]对多发性骨髓瘤细胞增殖和蛋白酶体20s复合物活性的影响。【方法】体外培养KM3多发性骨髓瘤细胞,在不同浓度EGCG作用不同时间后以MTT法测定细胞增殖活性;经不同浓度EGCG作用后的KM3细胞作用于蛋白酶体特异性底物,检测细胞中蛋白酶体20s复合物的活性。【结果】不同浓度的EGCG作用于KM3细胞不同时间,均能抑制其增殖,其作用在5-100μmol/L的浓度范围内呈剂量-时间依赖性。作用48小时后,各浓度药物对细胞增殖活性的抑制率均超过20%。作用相同时间,随着作用浓度的增高,EGCG对KM3细胞蛋白酶体活性的抑制作用逐渐增强,100μmol/L的EGCG作用后抑制率为78.5±4.46%,与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。【结论】EGCG对多发性骨髓瘤细胞KM3有明显的生长抑制作用,其对KM3细胞中20S蛋白酶体活性的抑制效应可能为其机制之一,并呈剂量依赖性。第二部分EGCG对多发性骨髓瘤细胞KM3促血管新生作用的抑制效应及机制初探【目的】研究绿茶茶多酚成分之一表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)- epigallocatechin -3-gallate] (EGCG)对多发性骨髓瘤细胞促血管新生作用的影响并初步探讨其机制。【方法】体外培养KM3多发性骨髓瘤细胞,观察不同浓度EGCG作用后的培养上清对血管内皮细胞株HUVEC迁移和形成血管能力的影响。ELISA法检测KM3细胞培养上清中血管内皮生长因子(VEGF)分泌水平;RT-PCR方法检测KM3细胞VEGF mRNA表达水平。【结果】EGCG以浓度依赖方式抑制KM3细胞培养上清促内皮细胞迁移的作用,5, 25, 50和100μmol/L的EGCG迁移细胞数目分别为414±27,299±70,202±42及116±13个,且EGCG的浓度与内皮细胞的迁移数目呈负相关(r= -0.952,p<0.05)。同时,内皮细胞形成小管的面积随EGCG浓度的升高而减少, 25及50μmol/L时的面积分别是0.088±0.003和0.061±0.001 mm2,均明显低于对照组(p<0.01),小管面积与EGCG浓度呈负相关(r= -0.888,p<0.05)。5、25、50、100μmol/L的EGCG作用于KM3细胞48小时后培养上清中VEGF的含量分别为1399.0±47.4pg/mL,660.1±5.7pg/mL,108.5±5.8pg/mL和26.2±18.6pg/mL,与对照组比较,25、50、100μmol/L组均有统计学意义(p<0.01)。RT-PCR结果显示EGCG抑制KM3细胞VEGF的mRNA水平表达,且呈浓度依赖性。【结论】EGCG能显著抑制KM3多发性骨髓瘤细胞的促血管新生作用;下调VEGF转录水平的表达,减少VEGF的分泌可能是其作用机制之一。