东北红豆杉枝叶抗肿瘤有效部位化学成分及药材标准研究

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:hl830320
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东北红豆杉(Taxus cuspidate Sieb.et Zucc.)又名紫杉,为红豆杉科植物。红豆杉主要代表成分紫杉醇,具有广谱的抗肿瘤作用,天然植物中含量极低,人工合成迄今为止还没有形成规模化生产,影响了其临床的应用。为此,本文对人工栽培东北红豆杉进行了研究。东北红豆杉70%乙醇提取物在体外抗肿瘤作用研究,发现对Bcap-37细胞,QGY-7701细胞,C6细胞,L1210细胞和K111细胞都有一定的细胞毒作用;东北红豆杉提取物对小鼠lewis肺癌、黑色素瘤B16、结肠癌colon26、肉瘤S180均有不同程度的抑制作用,且随着剂量的增大其抑瘤率增加,量效关系明显;东北红豆杉提取物31.25mg/kg剂量时,没有明显的抑制肿瘤作用,但与丝裂霉素、紫杉醇、环磷酰胺、氟尿嘧啶联合用药时,表现明显的协同作用,抑制率大于Webb氏分数乘积法计算的(fa)1,2。与Taxol相比,其作用大体相当或略高于Taxol,结合对该药作用机制的研究,可以认为这一组分抗肿瘤作用是确实的。为了进一步阐明人工栽培东北红豆杉干燥枝和叶的70%乙醇提取物抗肿瘤作用的物质基础和作用机理,运用各种化学和色谱方法对提取物进行了化学成分研究,通过硅胶、ODS等柱色谱和HPLC等手段,从中分离得到11个单体化合物,采用1H-NMR、13C-NMR、1H-1HCOSY、1H-13C COSY和HMBC等1D及2D-NMR波谱学测试技术,并结合ESI-MS等质谱,鉴定了11个化合物的化学结构,9种为已知化合物(Taxinine,Taxinine A,Taxinine M,Taxusin,1β-hydroxy baccatinⅠ,α-Conidendrin,Naringerin,BaccatinⅢ,Cephalomannine),2种为新化合物,分别被命名为紫杉酚Cuspidataol、紫杉新苷Taxacuspidatoside。采用高效液相色谱法,以1β-羟基-巴卡亭Ⅰ的色谱峰为参照峰,建立了东北红豆杉人工栽培品药材的指纹图谱测定法,并通过精密度、溶液的稳定性等测定进行了方法学考察,将其与东北红豆杉质量标准(黑龙江省中药材标准2001年版)结合制定了东北红豆杉药材标准。本文研究结果对人工栽培东北红豆杉的开发、利用具有重要的学术价值和应用价值。
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