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目的:观察早期干预对宫内感染致脑损伤仔鼠脑组织神经丝蛋白(NFP)表达及其神经行为的影响。
方法:1模型制备与分组:给予30只孕第17d的脂多糖(LPS)组孕鼠腹腔注射LPS,450μg/kg·d,连续两天;4只生理盐水组大鼠腹腔注射等量无菌生理盐水。孕22d前分娩的仔鼠为早产鼠,两组均去除早产鼠。2子宫及胎盘和脑组织病理学检测:仔鼠出生后,取子宫胎盘做HE染色观察宫内感染情况;仔鼠出生后24小时,随机选取生理盐水组和LPS组仔鼠,常规HE染色,观察脑白质损伤的情况。3随机选取24只生理盐水组孕鼠生产的足月产仔鼠,为对照组(n=24);72只LPS组孕鼠生产的足月产仔鼠,随机分为非干预组(n=24)、针刺干预组(n=16)、环境干预组(n=16)、针刺联合环境干预组(n=16)。4仔鼠7日龄时,分别随机选取对照组、非干预组仔鼠脑组织,进行脑组织NFP阳性染色的定量分析。5于仔鼠生后8日龄-35日龄,分别对针刺干预组、环境干预组、针刺联合环境干预组进行早期干预:对照组和非干预组常规饲养。6分别对21日龄、35日龄仔鼠采用悬吊试验进行神经行为学检测,并取各组仔鼠脑组织,应用免疫组织化学方法和图像分析方法,对仔鼠脑组织的NFP阳性染色进行定量分析。
结果:1生理盐水组孕鼠共娩出活产足月仔鼠39只、无死产仔鼠:LPS组30只孕鼠腹腔注射后,6只死亡,7只提前分娩,共娩出活产早产仔鼠28只、活产足月仔鼠116只、死产仔鼠81只。2LPS组胎盘病理检测见由腹腔注射LPS造成的宫内感染:1日龄仔鼠脑组织病理学检测示:脑白质染色淡、结构疏松等。3与对照组7日龄仔鼠比较,非干预组仔鼠脑白质区的NFP表达减少(P<0.01)。4仔鼠21日龄、35日龄仔鼠时,与对照组比较,非干预组、针刺干预组、环境干预组仔鼠的悬吊试验评分值均降低(P<0.01),针刺联合环境干预组21日龄仔鼠的悬吊试验评分值降低(P<0.05),35日龄仔鼠与对照组的差异没有统计学意义(P>0.05);LPS组的各组仔鼠脑白质区的NFP表达均减少(P<0.05);与非干预组相比,各干预组仔鼠的悬吊试验评分值均升高(P<0.05),仔鼠脑白质区的NFP表达均增加(P<0.01);各干预组之间,针刺联合环境干预组仔鼠的悬吊试验评分值最高(P<0.05),脑白质区的NFP的表达最强(P<0.01),针刺干预组与环境干预组仔鼠的悬吊试验评分值、脑白质区的NFP的表达之间的差异无统计学意义(P>0.05)。
结论:1腹腔注射LPS能导致宫内感染及仔鼠脑白质损伤。2宫内感染可引起仔鼠脑白质区NFP阳性表达减少、悬吊试验评分值的下降。3早期针刺干预、环境干预、针刺联合环境干预均能提高宫内感染导致的脑损伤后的脑白质区NFP阳性表达和肢体运动功能的恢复。4早期针刺联合环境干预优于单纯采用针刺或环境干预刺激对宫内感染导致的脑损伤的治疗效果。