三参方对慢性萎缩性胃炎大鼠的治疗作用及其机制研究

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目的:三参方(由党参、丹参、玄参、黄连、清半夏、炒白芍、炙甘草、陈皮、炒白术组成)具有益气养阴,健脾和胃,柔肝理气的功效,为临床观察筛选的效方,对慢性萎缩性胃炎(CAG)具有较好的治疗效果。为了进一步探讨其作用机制,参考相关文献采用脱氧胆酸钠和热盐水交替灌胃、并结合饥饱失常的方法复制CAG大鼠模型,并施加药物干预,观察了其对CAG大鼠胃泌素、胃动素、超氧化物歧化酶、丙二醛、内皮素-1、6-酮-前列腺素F1α含量的变化;运用免疫组织化学方法观察了大鼠表皮生长因子表达的变化;并运用HE染色方法观察了胃组织形态学的变化。方法:选用Wistar大鼠60只,体重180~200g,雄性。大鼠自由饮水进食,饲养于18℃~22℃明暗各12小时的清洁级动物实验室内,正常喂养一周后,随机分为6组,每组10只。具体分组情况如下:(1)正常对照组(简称正常组);(2)模型对照组(简称模型组);(3)三九胃泰对照组(简称三九胃泰组);(4)维霉素对照组(简称维霉素组);(5)三参饮低剂量组(简称低剂量组);(6)三参饮高剂量组(简称高剂量组)。除正常组外,其余各组参考相关文献,以0.2%的脱氧胆酸钠溶液灌胃,1.5ml/只/d,与脱氧胆酸钠溶液灌胃间隔5h,用50℃热水2ml/只/d灌胃,并且加用饥饱失常(即2d喂食,保证足量,1d停食),持续造模共8周。正常组大鼠则每天灌服等量的蒸馏水,普通饲料喂养,自由饮水。从实验第9周开始,正常组和模型组大鼠均灌服等量的蒸馏水;其余各组大鼠分别给予相应的药物灌胃,给药剂量按药理实验方法学计算,三参饮高、低剂量组分别按3.67g/kg、1.83g/kg体重的标准灌服,两个对照组均按1g/kg给药。各组大鼠均1次/d,每次用药体积均按1ml/100g计算。实验13周末,于最后1次给药禁食12h后麻醉状态下股动脉取血,分离血浆或血清,检测GAS、MTL、SOD、MDA、ET、6-Keto-PGF1α含量的变化。同时迅速剖开腹部,分离胃组织,沿胃窦近幽门口至胃大弯方向取1cm×0.5cm大小的组织块,将组织块用预冷的0.9%Nacl注射液冲洗,滤纸吸湿后,用4%的多聚甲醛固定,常规制作组织切片,运用免疫组化法观察了胃组织EGF表达的变化,运用HE染色法观察了胃组织形态学变化。所有数据均采用SPSS13.0软件进行统计分析。结果:1三参方对CAG大鼠血清GAS和血浆MTL含量的影响模型组大鼠的血清GAS和血浆MTL的含量较正常组明显下降(P<0.01)。经药物治疗后,各治疗组与模型组比较,GAS和MTL的含量明显升高(P<0.01或P<0.05);其中,高剂量组GAS和MTL的含量高于低剂量组、维霉素组和三九胃泰组(P<0.05);而低剂量组、维霉素组和三九胃泰组之间无统计学意义(P>0.05)。2三参方对CAG大鼠胃组织形态学的影响正常组大鼠胃黏膜厚度正常,上皮完整,腺体排列整齐,固有腺体及黏膜层毛细血管无扩张,未见炎症反应。细胞呈单层柱状,腺上皮和腺管分界清楚。模型组大鼠上皮细胞变性、坏死、脱落,腺体有不同程度的萎缩,黏膜下小血管清晰可见,间质内有大量炎性细胞浸润。各治疗组大鼠胃黏膜均有不同程度的改善,三九胃泰治疗组上皮细胞部分变性、脱落,腺体排列比模型组整齐,有少量炎性细胞浸润。维霉素治疗组胃黏膜有少量炎性细胞浸润,腺体排列较整齐。低剂量组腺体排列较整齐,紊乱程度变化较模型组轻。高剂量组胃黏膜结构较清晰,上皮排列整齐,细胞无明显变性坏死,腺体大小形态较一致,基本接近正常组。3三参方对CAG大鼠血清SOD和MDA含量的影响模型组大鼠SOD的活性较正常组明显减弱(P<0.01),MDA的含量较正常组明显升高(P<0.01)。经药物治疗后,各用药组与模型组比较,均能增强SOD的活性(P<0.01),降低MDA的含量;高剂量组SOD的活性高于其他治疗组、MDA的含量低于其他治疗组(P<0.01或P<0.05);在增强SOD的活性方面,其他治疗组之间无统计学意义(P>0.05);而在降低MDA的含量方面,三九胃泰组与低剂量组比较有统计学意义(P<0.05)。4三参方对CAG大鼠血浆ET-1和6-Keto-PGF1α含量的影响模型组大鼠ET-1的含量高于正常组、6-Keto-PGF1a的含量明显低于正常组(P<0.01)。经药物治疗后,各用药组ET-1的含量均低于模型组,6-Keto-PGF1a的含量均高于模型组(P<0.01或(P<0.05);高、低剂量组ET-1的含量低于于三九胃泰组和维霉素组(P<0.05);高剂量组6-Keto-PGF1a的含量高于三九胃泰组和维霉素组(P<0.01或P<0.05),低剂量组与三九胃泰组和维霉素组之间比较无统计学意义(P>0.05)。而高、低剂量组之间无统计学意义(P>0.05)。5三参方对CAG大鼠EGF表达的影响模型组大鼠胃组织EGF表达(0.363±0.035)较正常组(0.181±0.043)增强(P<0.01)。经药物干预后,各用药组大鼠EGF表达减弱(P<0.01或P<0.05)。其中,高剂量组(0.208±0.042)在减弱EGF表达方面优于其他治疗组(P<0.01),低剂量组(0.268±0.050)和维霉素组(0.278±0.045)在减弱EGF表达方面优于三九胃泰组(0.321±0.017()P<0.01或P<0.05),而低剂量组与维霉素组在减弱EGF表达方面比较无统计学意义(P>0.05)。结论:1三参方能够促进血中GAS和MTL的分泌,改善胃的分泌和运动功能,以达到治疗CAG的目的。2三参方能明显改善CAG大鼠胃组织的病理形态学变化。3三参方能增强SOD的活性、降低MDA的含量,通过抗自由基损伤,以达到治疗CAG的目的。4三参方能够降低ET-1、升高6-Keto-PGF1a的含量,保护血管内皮功能,改善胃黏膜的血液循环。5三参方通过抑制胃组织EGF的过度表达,促进胃黏膜细胞修复与再生,改善胃的功能状态。
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