多酸洗手液制备及抗甲型流感病毒效果评价

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目的:流行性感冒简称流感,是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病,具有传染性强、传播速度快、人群易感等特点,感染后出现头痛、头晕、流涕、发烧等症状,影响人们的生活质量,严重时还会引起死亡。最近一次甲型H1N1流感暴发流行发生在2009年4月,短时间内从墨西哥及美国迅速席卷全世界,在全球范围内造成18000人死亡。因此控制流感流行及预防病毒传播一直是公共卫生研究重点问题之一。空气和接触是流感病毒的两种主要传播途径,因而阻断病毒的传播途径,使用含有抗病毒功能成分的洗手液洗手,是一种快捷有效可行的方式。多酸化合物是一类金属氧簇化合物,研究表明多数具备keggin结构的多酸化合物可对多种RNA和DNA病毒具有较好的抑制作用。多酸化合物毒性较低,抗流感病毒活性较高,将多酸加入洗手液中,合成抗流感病毒洗手液,可以预防流感传播。本文设计合成含有多酸化合物的抗病毒洗手液,评价洗手液对甲型H1N1流感病毒抑制效果。方法:1.采用MDCK细胞为细胞模型检测K10Na[(VO)3(SbW9O33)2]·26H2O(化合物A)和K15[Pr(BW11O39)2]·28H2O(化合物B)的细胞毒性和体外抗甲型H1N1流感病毒活性;2.选用一般方法合成洗手液基质,然后分别加入高、中、低不同浓度的两种多酸化合物,制备含有多酸化合物抗病毒洗手液,根据GB19877.1-2005检测洗手液性能;3.依据美国洗手液评价标准方法(AmericanSociety for Testing and Materials, ASTM)评价洗手液抗H1N1甲型流感病毒效果,另外检测流感病毒在手部晾干30min和60min后的浓度和活力变化;4.按照《消毒技术规范》(2008版)选用昆明小鼠和白色家兔对洗手液安全性进行评价,评价内容包括一次最大限度试验、家兔完整皮肤刺激试验、家兔破损皮肤刺激试验、家兔急性眼刺激试验。结果:1.化合物A和B的细胞毒性TC50分别为2363.12mg/L和1301.25mg/L,化合物的体外抗H1N1活性IC50分别为28.58mg/L和18.82mg/L,治疗指数分别为82.68和69.13;2.洗手液外观、色泽、气味、总活性含量、pH值、固含量、泡沫高度、稳定性均符合GB19877.1-2005标准要求;3.ASTM标准方法试验中对照组的病毒浓度是104.29±0.41TCID50/0.1mL,各洗手液处理组组织培养法均未检测到病毒,各洗手液处理组病毒浓度低于对照组(P<0.001),30min和60min收集的病毒浓度分别103.98±0.42TCID50/0.1mL和103.83±0.35TCID50/0.1mL,与对照组比较无显著性差异(P>0.05);4.含高浓度A的洗手液对昆明小鼠的经口毒性试验LD50大于5000mg·kg-1(体质量),对家兔完整皮肤刺激指数为0.33,对家兔破损皮肤的刺激指数为1.33,对3只家兔眼刺激的平均评分分别是0、0.67和0.33。结论:含有化合物A和化合物B的洗手液对甲型H1N1流感病毒具有较好抑制作用,且毒性较低,对皮肤和眼刺激性小(无完整皮肤和眼刺激)。研究工作为开发具有抗甲型流感病毒的洗手液奠定基础。
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