【摘 要】
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目的:了解慢性粒细胞白血病患者外周血TCRVβ亚家族克隆性T细胞优势表达情况及体外诱导CML细胞特异性T细胞的TCRVβ亚家族利用及克隆性增殖情况,为利用CML细胞特异性TCRVβT细
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目的:了解慢性粒细胞白血病患者外周血TCRVβ亚家族克隆性T细胞优势表达情况及体外诱导CML细胞特异性T细胞的TCRVβ亚家族利用及克隆性增殖情况,为利用CML细胞特异性TCRVβT细胞进行细胞免疫治疗以清除微小残留病变(MRD)提供研究资料。 方法:通过RT-PCR技术分析16例CML患者外周血中TCRVβ亚家族T细胞的表达情况,并运用基因扫描技术分析优势表达的T细胞TCRVβ亚家族基因的CDR3长度从而了解其克隆性。用CML细胞、K562细胞和bcr/abl多肽诱导成人及脐血T细胞,并分析其TCRVβ亚家族的优势利用和克隆性特点,以及应用间接荧光单抗标记技术和LDH法分析诱导增殖的T细胞免疫表型和杀伤性。 结果:与正常人外周血表达全部24个TCRVβ亚家族T细胞不同,CML患者外周血T细胞仅部分Vβ亚家族,以Vβ13最多见,其次为Vβ1和Vβ3;优势Vβ亚家族T细胞的表达存在个体差异性;部分优势Vβ亚家族T细胞呈寡克隆性增殖的T生长。在体外,CML细胞、K562细胞和bcr/abl多肽可以诱导出呈寡克隆或寡克隆趋势生长的Vβ亚家族T细胞。通过对靶细胞CML细胞、K562细胞和Raji细胞的细胞毒性分析结果表明,与CD3AK细胞,两种细胞和多肽诱导的T细胞对CML的杀伤性具有显著性差异。MLTC获得的T细胞免疫表型以CD8~+T细胞为主。 结论:CML患者外周血T细胞呈选择性表达TCRVβ亚家族和克隆性增殖相关,该现象与CML相关抗原有关。CML细胞和bcr/abl多肽可在体外诱导出异体CML细胞特异性CTL,该CTL可能为优势表达的Vβ亚家族克隆性T细胞。本研究为CML特异性克隆性TCRVβT细胞免疫治疗提供研究基础。
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