黄芩素对胃癌HGC-27细胞增殖和凋亡的作用研究

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[目的]探讨黄芩素(Baicalein,BAI)对胃癌HGC-27细胞增殖和凋亡的作用及其机制。[方法]用不同浓度BAI处理胃癌HGC-27细胞后,采用MTT比色法检测胃癌细胞的增殖;平板克隆形成实验检测细胞的集落形成情况;划痕愈合实验观察细胞横向迁移能力;Transwell小室迁移实验检测细胞的纵向迁移能力;细胞凋亡情况采用Hoechst33342染色观察细胞凋亡小体的形成、采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot实验检测EMT标志物蛋白、凋亡相关蛋白的表达。[结果]1.MTT实验结果显示:与对照组相比,5、15、25μmol/L BAI分别处理胃癌HGC-27细胞24h、48h、72h,均可显著抑制HGC-27细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性(P<0.05或P<0.01)。2.平板克隆形成实验表明:与对照组相比,浓度为5、15、25μmol/L的BAI均可明显抑制胃癌HGC-27细胞的克隆形成(P<0.05或P<0.01)。3.划痕愈合实验表明:与对照组相比,25μmol/L的BAI处理胃癌HGC-27细胞24h和48h后,细胞的横向迁移能力明显降低(P<0.05)。4.Transwell小室迁移实验结果显示:与对照组相比,5、15、25μmol/L的BAI处理胃癌HGC-27细胞48h,细胞的纵向迁移能力明显降低(P<0.01)。5.Hoechst33342染色结果显示:与对照组相比,5、15、25μmol/L浓度的BAI作用于胃癌HGC-27细胞后出现了亮蓝色核固缩的凋亡小体,其数量随BAI浓度的增高而增多。6.流式细胞术检测细胞凋亡结果表明:与对照组比较,5、15、25μmol/L的BAI处理组的胃癌HGC-27细胞的凋亡比率明显升高(P<0.05或P<0.01)。7.Western blot实验结果表明:与对照组相比,BAI可使胃癌HGC-27细胞凋亡有关的蛋白Cleaved Caspase-3表达显著增加,Bcl-2表达及Bcl-2/Bax明显下降(P<0.05或P<0.01),EMT相关蛋白E-Cadherin的表达水平上升,Vimentin的表达水平下降(P<0.05或P<0.01)。[结论]1.BAI可有效抑制胃癌HGC-27细胞的增殖、诱导细胞凋亡,这与BAI调控促凋亡蛋白Cleaved Caspase-3和抗凋亡蛋白Bcl-2及Bcl-2/Bax表达水平相关。2.BAI可有效抑制胃癌HGC-27细胞横向和纵向迁移,这与BAI调控EMT相关蛋白表达水平相关。
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